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摘要:
目的 通过利用神经纤毛蛋白1(NRP1)不同表达水平的肺上皮细胞模型,检测电离辐射诱导上皮-间充质转化(EMT)标志物及相关转录因子表达变化,探讨NRP1对辐射诱导肺上皮细胞EMT发生中的作用.方法 对人肺Ⅱ型上皮细胞(A549)构建NRP1过表达(NRP1 high-A549)和NRP1敲低(NRP1low-A549)细胞模型,同时对小鼠正常肺上皮细胞(MLE-12)构建siNRP1-MLE-12细胞模型并进行验证.对NRP1 high-A549、NRP1low-A549和siNRP1-MLE-12细胞模型分别进行单次10 Gy X射线照射,于照射后0、12、24和48 h提取总蛋白和总RNA.利用Western blot法和q-PCR法检测各组细胞模型中EMT标志物(β3-catenin、N-cadherin和Vimentin)及相关转录因子(Twist和ZEB1)的变化.结果 野生型A549和MLE-12细胞照射后NRP1 mRNA和蛋白表达显著升高,间充质标志物(Vimentin和N-cadherin)显著升高(A549:t=2.917、7.361,P< 0.01;MLE-12:t=9.652、31.357,P<0.01),ZEB1和Twist转录因子表达显著升高(A549:t=4.852、9.278,P<0.01;MLE-12:t=30.985、17.266,P<0.01).NRP1low-A549和siNRP1-MLE-12组受照后Vimentin和N-cadherin表达显著下降(NRP1low-A549:t=10.077、15.707,P<0.01;siNRP1-MLE-12:t=5.745,P<0.01),上皮标志物(β-catenin)蛋白表达显著升高;而NRP1 high-A549组照射后N-cadherin和Vimentin显著升高(t=16.055、5.560,P<0.01),而β-catenin显著下降.检测NRP1low-A549组Twist转录因子在照射后显著下降(t=3.987,P<0.01),而NRP1 high-A549组ZEB1和Twist转录因子照射后呈时间依赖性升高(t=11.289、2.903,P<0.01);siNRP 1-MLE-12细胞模型照射后ZEB1转录因子显著下降(t=13.449,P<0.01),siNRP1-M LE-12组ZEB1和Twist蛋白表达均低于对照组,呈时间依赖性下降.结论 NRP1可促进辐射诱导人和小鼠上皮细胞的EMT发生,而这种促进作用可能通过上调转录因子ZEB1和Twist的表达.
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文献信息
篇名 神经纤毛蛋白1在辐射诱导肺上皮细胞转化中的调控作用
来源期刊 中华放射医学与防护杂志 学科
关键词 神经纤毛蛋白1(NRP1) 电离辐射 上皮-间充质转化(EMT) 转录因子
年,卷(期) 2019,(2) 所属期刊栏目 放射生物学
研究方向 页码范围 81-87
页数 7页 分类号
字数 4255字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2019.02.001
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神经纤毛蛋白1(NRP1)
电离辐射
上皮-间充质转化(EMT)
转录因子
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中华放射医学与防护杂志
月刊
0254-5098
11-2271/R
16开
北京市德外新康街2号
18-93
1981
chi
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