基于单个B细胞抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的研制

• 作者: 张志东 张雨 朱学亮 李彦敏 殷相平 秦晓东
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 单个B细胞 口蹄疫病毒 抗体 流式分选技术 单细胞巢式PCR
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1082-1089
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0141

摘要

为了建立基于单个B细胞制备抗体技术,本研究以O型灭活FMDV为抗原,采集健康C57/BL小鼠脾细胞,经过磁珠富集、流式B220 +/CD38 +/IgG1+/抗原+分选,获得单个抗原特异性的B细胞.经单细胞巢式PCR反应扩增获得抗体完整轻、重链可变区序列后,分别构建轻/重链表达质粒,然后共转染HEK-293细胞后,成功获得3株特异性单克隆抗体,且证明均属于IgG1型抗体;ELISA结果显示,获得的3株抗体均能与O型FMDV抗原结合;免疫荧光试验证明,3株抗体能够特异性结合细胞内复制的O型FMDV.本研究成功建立了基于单个B细胞直接制备抗FMDV单抗的方法,为后期开发特异性单克隆抗体打下了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雨	中国农业科学院兰州兽医研究所	60	491	12.0	18.0
2	殷相平	中国农业科学院兰州兽医研究所	19	107	7.0	10.0
3	朱学亮	中国农业科学院兰州兽医研究所	9	2	1.0	1.0
4	秦晓东	中国农业科学院兰州兽医研究所	7	5	2.0	2.0
5	张志东	中国农业科学院兰州兽医研究所	10	2	1.0	1.0
6	李彦敏	中国农业科学院兰州兽医研究所	3	0	0.0	0.0