用protein G纯化口蹄疫病毒单克隆抗体的特性分析

• 作者: 丛国正 宋帅 常惠芸 林彤 独军政 邵军军 高闪电
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 农学
• 关键词: O型口蹄疫病毒 单克隆抗体 链球菌G蛋白 亲和层析
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 139-142
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4620字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.02.012

摘要

目的 为了获得高效价和高纯度的O型口蹄疫病毒单克隆抗体.方法 用O型口蹄疫乳鼠毒(LD50=10-8.5)感染免疫小鼠,按有限稀释法和ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞株,制备单抗腹水,所收腹水用50%和45%的饱和硫酸铵沉淀,再用protein G亲和层析柱进行亲和层析纯化单体,并用SDS-PAGE和单抗检测方法分析其纯化抗体的纯度和活性.结果 经3次亚克隆获得了一株杂交瘤细胞株(10E6),抗体亚类鉴定为IgG2a;SDS-PAGE电泳显示,纯化的抗体纯度较高,只有IgG2a的重链和轻链,而没有其它杂蛋白带;单抗ELISA检测方法显示,纯化的抗体具有良好的活性,其效价为1∶102 400,高于腹水效价.结论 用protein G亲和层析法获得了高纯度和高效价的单克隆抗体,将为O型口蹄疫病毒的基础研究和应用研究奠定基础.