芥菜型油菜BjuA09DFR基因及其启动子的克隆与转化和表达

• 作者: 刘显军 徐新仁 曾贤军 朱守晶 肖强 袁玉辉 邹杰
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 芥菜型油菜 4-二氢黄酮醇还原酶基因(DFR) 启动子 拟南芥转化 GUS组织化学染色
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 24-31
• 页数: 8页
• 分类号: Q785|Q786|Q789
• 字数: 5013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2019.01.0024

摘要

该研究利用实时荧光定量(qRT-PCR)检测了Bj uA09 DFR基因的时空表达特异性,并通过克隆BjuA09DFR基因启动子片段,构建该基因的启动子GUS融合表达载体,利用农杆菌介导法将重组质粒转入野生型拟南芥,最后对拟南芥转基因材料不同发育时期的不同组织部位进行GUS组织化学染色,分析BjuA09DFR基因启动子的表达模式,为Bj uA09 DFR基因启动子功能的进一步研究提供理论依据.结果表明:(1)BjuA09DFR基因在芥菜型油菜的多个组织部位都有表达,尤其是在叶、花、角果和授粉后15 d种子中表达量较高.(2)成功构建了BjuA09DFR基因启动子和GUS基因融合表达载体(pBjuA09DFR∷GUS),采用农杆菌介导法将重组质粒转入野生型拟南芥,经卡那霉素筛选和PCR检测抗性苗,获得转基因拟南芥阳性苗.(3)GUS组织化学分析结果显示,转基因拟南芥材料的GUS活性具有明显的时空特异性,在叶、花、角果和种子中的染色较深,具有很强的GUS活性.