铁皮石斛DcCDPK8基因启动子克隆及功能分析

• 作者: 斯金平 朱玉球 汪园 高燕会
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 铁皮石斛 DcCDPK8启动子 瞬时转染 组织化学染色
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 分子生药学
• 页码范围: 293-297
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

铁皮石斛钙依赖性蛋白激酶基因DcCDPK8参与低温激素ABA和MeJA的信号转导过程,但转录调控尚不明确,为了研究铁皮石斛DcCDPK8基因的核心启动子区域,并对其转录调控机制进行探讨,采用PCR技术克隆铁皮石斛DcCDPK8基因启动子序列,并利用5'端缺失和GUS基因的融合表达研究启动子序列功能.结果表明DcCDPK8基因启动子序列含有1个低温响应元件LTR(-1 749～-614 bp),2个茉莉酸甲酯响应元件(-1 749～-230 bp)和1个ABA响应元件(-614～-230 bp),构建3个5'端不同缺失片段融合GUS报告基因的pBI121真核表达载体,瞬时转化烟草叶片,经低温胁迫后GUS活性强弱为DcCDPK8-p1＞ DcCDPK8-p2＞ DcCDPK8-p3,经外源ABA诱导后GUS活性DcCDPK8-p1＞ DcCDPK8-p2＞ DcCDPK8-p3,而经外源MeJA诱导后GUS活性DcCDPK8-p1＞ DcCDPK8-p2＞ DcCDPK8-p3,推测DcCDPK8基因启动子序列中ABA响应元件(ARE)对外源ABA的响应起正调控作用,而MeJA顺式作用元件对外源茉莉酸甲酯响应起抑制作用.