栀子苷对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞DNA异常甲基化的双向调节作用

• 作者: 吴立旗 周庆兵 徐凤芹
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 栀子苷 RAW264.7来源泡沫细胞 动脉粥样硬化 甲基化
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 853-858
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20190103.001

摘要

目的 观察栀子苷对ox-LDL诱导的RAW264.7来源泡沫细胞DNA甲基化的作用.方法 以ox-LDL诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞模型;CCK-8法检测不同浓度栀子苷对泡沫细胞的增殖抑制情况;将细胞分为4组,分别为空白对照组(无处理)、模型组(80 μg/mL ox-LDL处理)、栀子苷小剂量组(80 μg/mL ox-LDL +30 μμg/mL栀子苷)、栀子苷大剂量组(80 μg/mL ox-LDL +100 μg/mL栀子苷),处理24 h后收集细胞,总胆固醇试剂盒检测栀子苷降脂效应;同时提取DNA,进行甲基化免疫共沉淀联合测序(Medip-seq)检测,并对差异甲基化基因进行GO与Pathway分析.结果 红油O染色结果提示:以80 μg/mL ox-LDL处理的RAW264.7细胞泡沫化最为明显;栀子苷对RAW264.7来源泡沫细胞无细胞毒作用;大剂量栀子苷(100 μg/mL)能够降低细胞总胆固醇(P=0.04).与空白组比较,模型组共有大量异常差异基因甲基化(包括异常的基因高甲基化与基因低甲基化).涉及多个AS相关功能与通路,如蛋白激酶C活性,MAPK信号通路、PPAR信号通路、Wnt信号通路等;小剂量与大剂量栀子苷(30 μg/mL与100 μg/mL)均能改变泡沫细胞中异常的基因甲基化,涉及蛋白激酶C功能、Wnt信号通路、MAPK信号通路、PPAR信号通路等.栀子苷不仅能去甲基化,同时还能促甲基化.结论 栀子苷可能通过对ox-LDL诱导的泡沫细胞异常基因甲基化进行双向调控实现抗AS效应.