6-姜酚对大鼠髓核细胞凋亡的影响

• 作者: 冯新民 刘洋 南利平 周诗丰 张亮 张文捷 王峰 王曙光 蔡同川 陈东
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 6-姜酚 髓核细胞 细胞凋亡 椎间盘退变 PI3K/Akt信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 2078-2085
• 页数: 8页
• 分类号: R363.2|R681.5+8
• 字数: 5177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.11.023

摘要

目的:研究6-姜酚对过氧化氢(H2 O2)诱导的大鼠髓核细胞凋亡的影响及其可能机制.方法:获取SD大鼠髓核细胞并在体外扩增培养,CCK-8法测定不同浓度H2 O2及6-姜酚对髓核细胞活力的影响,同时采用Western blot检测6-姜酚作用不同时间后p-Akt的蛋白水平.实验分为4组:对照组、H2 O2组、6-姜酚组(6-姜酚+H2O2)及LY294002组(6-姜酚+H2O2+LY294002).流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧簇(ROS)水平,TUNEL荧光比较凋亡细胞比率,透射电镜观察线粒体微结构改变,Western blot检测caspase-3、Bcl-2、Bax、p-Akt、Akt及p53蛋白的水平,RT-qPCR检测蛋白多糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达.结果:CCK-8实验结果发现24 mg/L为6-姜酚促进大鼠髓核细胞活力的最佳浓度,80μmol/L的H2 O2作用6 h可用于氧化损伤造模.p-Akt的蛋白水平随6-姜酚干预时间延长而增多.与对照组比较,H2 O2组的细胞凋亡率、细胞内ROS水平及TUNEL染色阳性细胞比率增高,细胞线粒体肿胀明显,同时促凋亡蛋白caspase-3、Bax及p53的蛋白水平明显增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,蛋白多糖及Ⅱ型胶原的mRNA表达下降(P<0.05);与H2 O2组比较,6-姜酚可以减少H2 O2造成的髓核细胞凋亡及相关凋亡蛋白表达,而PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002可以抑制6-姜酚的作用.结论:6-姜酚可经PI3K/Akt信号通路减轻H2 O2诱导的髓核细胞氧化损伤,抑制髓核细胞凋亡,促进髓核细胞外基质表达.