β-谷甾醇诱导人胃癌细胞自噬与凋亡的作用及机制研究

• 作者: 刘晓巍 孙玉成 片光哲
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 关键词: β-谷甾醇 胃肿瘤 自噬 细胞凋亡 体外研究
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 866-871
• 页数: 6页
• 字数: 4502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2019.06.015

摘要

目的 从体内外两个方面研究β-谷甾醇诱导胃癌细胞自噬的作用及机制,为β-谷甾醇抗胃癌作用研究提供实验依据.方法 体外培养人胃癌SGC-7901细胞,设对照组和实验组,对照组仅用磷酸盐缓冲液(PBS)处理,实验组以不同浓度β-谷甾醇处理.四唑盐比色法(MTT)检测β-谷甾醇对胃癌细胞的抑制作用,流式细胞术检测β-谷甾醇对胃癌细胞的促凋亡作用,绿色荧光蛋白标记法(GFP)检测β-谷甾醇对胃癌细胞自噬诱导作用,蛋白印迹法(Western-blot)检测信号通道蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达.用SGC-7901细胞制造胃癌裸鼠模型,经腹胫注射β-谷甾醇,3d给药1次,共42d,观察移植瘤重量体积变化,免疫组化法检测移植瘤组织LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ表达.结果 实验组β-谷甾醇浓度达20 μmol/L时可明显抑制SGC-7901细胞活力,促进SGC-7901凋亡,与对照组比较差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01);β-谷甾醇诱导SGC-7901细胞发生自噬效应,(20、40、80、160μmol/L)实验组细胞自噬率(19.32±2.51、32.25±3.18、57.45±4.02、78.93 ±4.21)与对照组(7.28±2.83)比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);实验组β-谷甾醇下调p-PI3K、p-AKT及mTOR表达,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);实验组抑瘤率为(69.8±3.6)％,移植瘤的重量和体积明显减轻变小,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);实验组β-谷甾醇上调裸鼠移植瘤细胞LC3-Ⅱ表达,下调LC3-Ⅰ表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ (7.76±0.35)升高,与对照组(0.32±0.21)比较,差异有统计学意义(t=7.28,P =0.008).结论 β-谷甾醇能抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡,其抗癌机制可能与β-谷甾醇通过PI3 K/AKT/mTOR通路诱导细胞自噬作用有关.