不同载体微球在p300与RORγt Co-IP实验效率的比较

• 作者: 任翠平 刘彪 刘淼 殷浩程 沈际佳 滕霄 王秀男
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: p300 维甲酸相关孤儿核受体 Co-IP Protein A/G-琼脂糖珠 Protein A/G-磁珠
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1722-1725
• 页数: 4页
• 分类号: R341.31
• 字数: 3579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.11.012

摘要

目的 在免疫共沉淀(Co-IP)过程中使用Protein A/G-琼脂糖珠捕获蛋白和使用Protein A/G-磁珠捕获蛋白的比较分析.方法 先通过共转染Flag-p300和Myc-RORγt质粒入人胚肾细胞系293T (HEK293T)进行过表达,裂解细胞制备蛋白,分别使用Protein A/G-琼脂糖珠捕获蛋白和使用Protein A/G-磁珠捕获蛋白进行Co-IP;再通过分离人脐血单个核细胞诱导分化人辅助性T细胞17(Th17)进行Co-IP比较分析;通过CCK8实验排除转染试剂等对细胞活性毒性.结果 过表达的HEK293T细胞和诱导分化的Th17细胞中均显示腺病毒E1A结合蛋白(p300)与维甲酸相关孤儿核受体(RORγt)在Co-IP过程中使用Protein A/G-磁珠捕获大分子的p300蛋白效果好于中分子的RORγt蛋白,使用ProteinA/G-琼脂糖珠捕获中分子的RORγt蛋白效果好于大分子的p300蛋白.结论 在Co-IP过程中使用Protein A/G-磁珠捕获大分子蛋白效果较好,使用Protein A/G-琼脂糖珠捕获中分子蛋白效果较好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈际佳	安徽医科大学病原生物学教研室	84	364	10.0	14.0
2	刘淼	安徽医科大学病原生物学教研室	39	98	6.0	7.0
3	任翠平	安徽医科大学病原生物学教研室	24	96	6.0	9.0
4	王秀男	安徽医科大学病原生物学教研室	2	1	1.0	1.0
5	滕霄	安徽医科大学生命科学院	1	0	0.0	0.0
6	刘彪	安徽医科大学生命科学院	3	1	1.0	1.0
7	殷浩程	安徽医科大学生命科学院	1	0	0.0	0.0