植物中验证蛋白相互作用的Pull-down和Co-IP技术

• 作者: 徐重益
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 植物 蛋白互作 Pull-down Co-IP
• 年，卷（期）: 2021,（null）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 62-68
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11983/CBB19143

摘要

蛋白互作在细胞生命活动中发挥关键作用，在不同时空层面上参与多种细胞学过程，因此研究蛋白互作对理解分子 调控网络至关重要。通常情况下，利用酵母双杂交系统筛选植物蛋白互作必须通过体外和体内系统进行验证。Pull-down和 Co-IP是验证植物蛋白互作的常用技术。Pull-down被广泛用于体外验证蛋白间的直接互作；而在植物活体内，利用本氏烟 草(Nicotiana benthamiana)叶片瞬时表达蛋白，继而通过Co-IP进行鉴定是目前验证蛋白互作最简单且最有效的方法之 一。该文对GST Pull-down和烟草瞬时表达系统中Co-IP技术原理及实验方案进行详细描述，以期为验证植物蛋白互作提 供参考。