有限稀释法制备RecQ解旋酶单克隆抗体1C1及鉴定

• 作者: 何志旭 刘杰麟 张荣红 贾铁文
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RecQ解旋酶 单克隆抗体 制备 鉴定 有限稀释法
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 专题研究1
• 页码范围: 130-135
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4733字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.02.001

摘要

目的:通过有限稀释法制备抗RecQ单克隆抗体(mAb),鉴定其生物学特性.方法:以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫Balb/c小鼠,融合免疫小鼠的脾细胞及SP2/0骨髓瘤细胞,有限稀释法筛选杂交瘤细胞,制备mAb;使用间接ELISA法鉴定单克隆抗体亚型、效价,Western-Blot法测定单克隆抗体特异性;将mAb与RecQ解旋酶结合后,观察mAb对RecQ解旋酶活性的阻断作用.结果:获得1株能稳定分泌抗RecQ解旋酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C1,该杂交瘤细胞染色体数目在94 ～ 104;1C1分泌的单克隆抗体类型为IgG1型,1C1株所得上清液和腹水中抗体效价分别为1×10-3和1×10-5,该单克隆抗体可特异性结合RecQ,并可抑制RecQ解旋酶的结合DNA活性.结论:成功制备1株抗RecQ mAb,效价高、特异性强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘杰麟	贵州医科大学组织工程与干细胞中心	14	32	3.0	4.0
5	何志旭	贵州医科大学组织工程与干细胞中心	40	65	4.0	6.0
6	张荣红	贵州医科大学组织工程与干细胞中心	3	5	1.0	2.0
10	贾铁文	贵州医科大学组织工程与干细胞中心	2	5	1.0	2.0