巢式-荧光定量PCR技术快速检测生殖支原体

• 作者: 万成松 付牧青 华颖 唐时幸 李以圣 牛丛 王湘雨 薛耀华
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生殖支原体 MgPa基因 巢式-荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 检验技术
• 页码范围: 972-976
• 页数: 5页
• 分类号: R518.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13735/j.cjdv.1001-7089.201806054

摘要

目的 建立生殖支原体巢式-荧光定量PCR快速检测技术.方法 针对生殖支原体MgPa基因的保守片段(1 414 ～1 561bp),利用Primer express 3.0设计引物及探针,巢式PCR扩增临床样本,纯化后克隆到载体,制备阳性标准品.优化PCR反应条件,研究其特异性、灵敏性和重现性. 结果 构建了含MgPa基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在101 ～ 109拷贝数之间有较好的线性关系.该方法检测阳性率高达15.4％,能特异性检测生殖支原体,而人型支原体、解脲脲原体、沙眼衣原体等检测为阴性;灵敏度高,可检测到10个拷贝数;3组重复试验的变异系数均小于3％.结论 本研究建立了生殖支原体的快速检测技术,具有检测阳性率高、特异性强、灵敏度高、重现性好等特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万成松		54	328	12.0	16.0
2	薛耀华		7	13	2.0	3.0
3	唐时幸		6	11	2.0	3.0
4	王湘雨		5	3	1.0	1.0
5	付牧青		1	0	0.0	0.0
6	李以圣		4	5	2.0	2.0
7	牛丛		3	4	2.0	2.0
8	华颖		3	3	1.0	1.0