siRNA可降低IL-1β刺激椎间盘细胞所致凋亡敏感性

• 作者: 尹荷珊 时明 汪震 王延 王鹏云 韩敦富 魏超
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 椎间盘细胞 凋亡 siRNA IL-1β RNA干扰
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 64-68
• 页数: 5页
• 分类号: R318.04
• 字数: 3847字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.01.013

摘要

目的 明确siRNA是否可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,并初步探讨其机制.方法 用阴性对照siRNA转染原代大鼠腰椎间盘细胞后,用含10ng/ml IL-1β的1％胎牛血清(FBS)培养基和被转染椎间盘细胞共培养,分别在4、8、16、32 h检测其对Fas受体(Fas)表达的影响.利用Fas-siRNA和阴性对照siRNA分别对原代大鼠椎间盘细胞进行转染48 h后,实验分组和处理:共分5组,N、N-20 ng、N-IL为阴性对照siRNA转染细胞,Si-20 ng、Si-IL为Fas-siRNA2转染的细胞.N为对照组,只加1％FBS培养基;N-20 ng和Si-20 ng在1％FBS培养基培养8 h后,更换为含20 ng/ml Fas配体(Fas L)的1％FBS培养基;N-IL和Si-IL:与10 ng/ml IL-1β在1％FBS培养基中培养8 h后,更换为含20 ng/ml Fas L的1％FBS培养基;以上各组加入20 ng/ml Fas L后均继续培养24 h,观察细胞的凋亡情况,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot分别检测Fas mRNA和蛋白表达水平.结果(1)与10 ng/ml IL-1β共培养的阴性对照siRNA转染细胞的Fas mRNA在4 h时开始升高,但32 h时才出现统计学差异;而蛋白检测各时间点均未出现表达差异.(2)经IL-1β预处理的Si-IL、N-IL细胞组较相应的未经IL-1β预处理的Si-20 ng、N-20 ng细胞组,细胞凋亡率均升高;Fas-siRNA转染的Si-IL细胞组较阴性siRNA转染的N-IL细胞组的细胞凋亡率明显下降.(3)细胞凋亡率与Fas的表达具有相关性.结论 siRNA可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,但其确切机制尚需进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏超	山东省淄博市中心医院脊柱外科	8	21	2.0	4.0
2	韩敦富	山东省淄博市中心医院脊柱外科	6	27	3.0	5.0
3	王鹏云	山东省淄博市中心医院脊柱外科	2	9	2.0	2.0
4	汪震	山东省淄博市中心医院脊柱外科	2	9	2.0	2.0
5	尹荷珊	山东省淄博市中心医院脊柱外科	4	5	2.0	2.0
6	王延	山东省淄博市中心医院脊柱外科	3	6	2.0	2.0
7	时明	山东省淄博市中心医院脊柱外科	1	2	1.0	1.0