分子伴侣共表达对核糖核酸酶R可溶性表达的影响

• 作者: 李站胜 李轲 韩双艳
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: RNase R 可溶性表达 分子伴侣 共表达系统
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 93-99
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.11.013

摘要

核糖核酸外切酶R(RNaseR)可降解几乎所有的线性RNA分子和Y结构RNA,但不易降解环形RNA(circRNA)、套索结构(lariat RNA)和3’突出末端少于7个核苷酸的双链RNA分子,因此可以构建内含子cDNA文库用于可变剪切研究.本研究构建了含rnr基因的重组表达质粒pET-22b(+)-rnr,并将其表达产物纯化后通过SDS-PAGE分析和酶活性评价,确认rnr基因在大肠杆菌中已实现表达.之后构建4种分子伴侣共表达系统(pGro7、pKJE7、pTf16和pG-Tf2).4种分子伴侣质粒分别与重组表达质粒pET-22b(+)-rnr共表达,筛选最适分子伴侣质粒,并优化共表达条件,提高目的蛋白可溶性表达.实验表明,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了43.80％,效果最为显著;20℃诱导时目的蛋白的可溶性表达最高;当L-阿拉伯糖浓度为0.50 mg/mL时,分子伴侣质粒pGro7使蛋白表达量提高了54.50％.通过使用分子伴侣共表达系统及优化表达条件提高了RNase R的可溶性表达,为该酶进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩双艳		58	583	12.0	22.0
2	李站胜		4	0	0.0	0.0
3	李轲		1	0	0.0	0.0