小鼠核糖核酸酶抑制剂异源高效可溶性表达、纯化及活性研究

• 作者: 付大伟 孙莹莹 徐伟
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 核糖核酸酶抑制剂 融合标签 诱导表达 磁珠纯化
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 174-178,183
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.1
• 字数: 4729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.10.029

摘要

为获得高效可溶性表达的小鼠核糖核酸酶抑制剂(MRNI),本文通过构建含SUMO、1F2、GST、NusA、MsyB、Trx和MBP融合标签的重组表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌进行自诱导(auto-induction,AI)表达,利用MagNi磁珠检测及电泳分析MRNI的表达状况,并对其培养温度及时间进行优化,同时,与其他公司核糖核酸酶抑制剂(RI)活性进行对比.结果 表明,重组菌BIL21(DE3)(pNBEII-MRNl)诱导表达的可溶性融合蛋白IF2-MRNI的产量最高,最适诱导条件为37℃,诱导培养6h,20℃培养24 h.磁珠纯化后获得的融合蛋白IF2-MRNI浓度为3621.3 mg/L,检测其酶活性约为40 U/μL.该酶具有抑制RNase A活性,防止RNA被降解的作用,为RI的生产及应用提供理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐伟	哈尔滨商业大学食品科学与工程重点实验室	45	205	8.0	12.0
2	付大伟	哈尔滨商业大学食品科学与工程重点实验室	10	28	3.0	4.0
3	孙莹莹	哈尔滨商业大学食品科学与工程重点实验室	4	3	1.0	1.0