膜荚黄芪3个苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与表达分析

• 作者: 全雪丽 刘俊频 吴松权 李胜立 袁元 郑玲辉
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 膜荚黄芪 苯丙氨酸解氨酶 基因克隆 表达分析 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1669-1675
• 页数: 7页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2019.07.026

摘要

目的 克隆膜荚黄芪苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因家族成员,分析它们在不同组织中的表达模式与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量变化,为揭示膜荚黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累的分子机制提供理论依据.方法 以膜荚黄芪总RNA为模板,采用同源克隆法和RACE技术克隆PAL基因并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术测定PAL基因在根、茎、叶中的表达量;采用HPLC法测定了根、茎、叶中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量.结果 从膜荚黄芪中克隆了3个PAL基因AmPAL1、AmPAL2、AmPAL3,Genbank登陆号分别为KY086279、KY086280、KY086281.AmPAL1、AmPAL2和AmPAL3的全长cDNA长度分别为2 508、2 401、2498bp,均含有2 157 bp的完整开放阅读框,编码718个氨基酸.蛋白质序列分析表明,它们均含典型的PAL酶活中心序列,与植物PAL蛋白同源,且与同属于豆科的植物PAL蛋白相似性最高.系统进化树表明,AmPAL1与AmPAL2和AmPAL3聚为不同的亚类.实时荧光定量PCR分析发现,这些基因在根、茎、叶中表达模式不同,在检测的所有组织中AmPAL1的表达量最高、AmPAL2的表达量次之、AmPAL3的表达量最低,只有AmPAL2的表达水平与毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累变化一致(即根＞茎＞叶).结论 从膜荚黄芪中克隆的AmPAL1、AmPAL2和AmPAL3是典型的PAL基因家族成员,推测它们在膜荚黄芪各组织发育过程中起着不同的作用,且AmPAL2可能参与了毛蕊异黄酮葡萄糖苷的积累.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	全雪丽	延边大学农学院	91	361	8.0	13.0
2	吴松权	延边大学农学院	112	637	13.0	17.0
3	郑玲辉		7	16	2.0	3.0
4	袁元	延边大学农学院	6	7	2.0	2.0
5	刘俊频	延边大学农学院	3	4	1.0	2.0
6	李胜立		1	0	0.0	0.0