红花ERF1转录因子的克隆及植物表达载体的构建

• 作者: 刘建雨 刘秀明 吕彦曦 姚娜 宫彦红 李海燕 杜卫红 杨龙宇 董园园
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 红花 AP2/ERF转录因子 黄酮合成 基因克隆 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 963-969
• 页数: 7页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2019.04.026

摘要

目的 克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列,并构建植物表达载体.方法 在红花转录组测序基础上,利用RT-PCR方法克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列(CtERF1)并进行生物信息学分析,利用ClustalW 1.83软件构建系统进化树,在CtERF1基因序列两端引入Spe Ⅰ和XbaⅠ酶切位点,构建含有35 S启动子的植物超表达载体pBASTA-CtERF1.结果 CtERF1基因编码297个氨基酸,且具有典型的AP2/ERF基因的功能结构域,含有1个AP2区域,为ERF亚族蛋白,亚细胞定位分析推测其定位在细胞质和细胞核上.系统进化分析表明,CtERF1基因编码氨基酸与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与杨树和人参的亲缘关系最近.通过分子生物学方法,成功构建pBASTA-CtERF1植物表达载体.结论 成功克隆了1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区基因CtERF1,并构建了植物表达载体pBASTA-CtERF1.