基于GPER介导途径探讨隐丹参酮诱导人乳腺癌SKBR-3细胞凋亡的分子机制

• 作者: 孙丽萍 崔丽霞 牛建昭 石丹宁 赵丕文 陈梦
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 隐丹参酮 GPER 乳腺癌 SKBR-3 PI3K/AKT 细胞凋亡 植物雌激素
• 年，卷（期）: 2019,（22）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 4905-4911
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20190527.401

摘要

基于G蛋白偶联雌激素受体(GPER)及其介导的PI3K/AKT途径探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)诱导人乳腺癌细胞凋亡的效应及其分子机制.选用核ER阴性、GPER阳性人乳腺癌SKBR-3细胞,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测CPT对细胞凋亡率的影响,Western blot法检测CPT对凋亡效应蛋白caspase-3表达的影响;Western blot及免疫荧光技术检测CPT对GPER介导的PI3K/AKT通路上关键蛋白表达的调控效应;同时,为进一步明确GPER介导的PI3K/AKT信号通路在CPT诱导SKBR-3细胞凋亡中的作用,选用GPER特异性激动剂G1、特异性拮抗剂G15及PI3K特异性抑制剂LY294002进行干预.结果 显示,5,10 μmol·L-1 CPT作用48 h后,SKBR-3细胞的凋亡率上升为46.1％,69.0％ (P＜0.01),caspase-3表达则随着CPT浓度增加而升高(P＜0.01).PI3K,AKT,p-AKT蛋白表达均可被CPT抑制(P＜0.05或P＜0.01),G1与5μmol·L-1 CPT联合作用48 h后可见AKT与p-AKT的表达量进一步降低(P＜0.05),而G15与5μmol· L-1 CPT联合作用后AKT与p-AKT表达的下降被明显抑制(P＜0.05);1μmol· L-1 LY294002干预下,可见AKT,p-AKT的表达受到了更为明显的抑制(P＜0.01).AKT与p-AKT的荧光表达强度同样能够受到CPT抑制,G1,G15,LY294002的干预与Western blot结果一致(P＜0.05或P＜0.01).此外,CPT对SKBR-3细胞中GPER表达具有一定的抑制效应(P＜0.01),加入G1可相对抑制CPT对GPER表达的下调作用;加入G15可使CPT对GPER表达的抑制作用进一步增强.综上,隐丹参酮可诱导人乳腺癌SKBR-3细胞凋亡,其分子途径可能与隐丹参酮对GPER表达及其介导的PI3K/AKT信号通路的调控作用有关.