分子排阻高效液相色谱法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白纯度

• 作者: 刘宇阳 张艳丽 杨军 毛晓燕 王婉如 高雪峰
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子排阻高效液相色谱 促胰岛素分泌肽融合蛋白 纯度 验证
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: Q503
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2020.05.003

摘要

目的 建立检测促胰岛素分泌肽融合蛋白(Exendin-4-Fc fusion protein,简称E4F4)纯度的分子排阻高效液相色谱法(size exclusion high performance liquid chromatography,SEC-HPLC),并对该方法进行验证.方法 使用Waters 515系列高效液相色谱仪,利用TSK G2000SWxL色谱柱检测E4F4的纯度,并从系统适应性、专属性、重复性和中间精密度进行验证,同时使用20、50、100 mmol/L磷酸盐缓冲液的流动相对样品进行了6次纯度检测.结果 空白溶剂在目标峰积分范围内无干扰峰;专属性验证表明样品与阴性对照分离度良好;6次重复进样目标峰面积相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.49％,保留时间RSD为0.11％;中间精密度分析目标峰面积RSD为0.47％,保留时间RSD为0.48％;使用不同盐浓度(20～100 mmol/L PBS,pH 6.8)的流动相对样品进行6次纯度检测后,各样品纯度均大于99.0％,目标峰面积RSD为0.53％,保留时间RSD为0.76％.结论 经验证,建立的SEC-HPLC法各项指标均符合要求,可用于E4F4的纯度检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨军	兰州生物制品研究所有限责任公司	13	32	3.0	4.0
2	毛晓燕	兰州生物制品研究所有限责任公司	17	72	4.0	7.0
3	王婉如	兰州生物制品研究所有限责任公司	2	0	0.0	0.0
4	高雪峰	兰州生物制品研究所有限责任公司	9	15	2.0	3.0
5	刘宇阳	兰州生物制品研究所有限责任公司	2	0	0.0	0.0
6	张艳丽	兰州生物制品研究所有限责任公司	1	0	0.0	0.0