胆碱能M受体调控细胞周期蛋白依赖性激酶5及其在敌敌畏诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用

• 作者: 周琥 杨培 王丽韫 王永安
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胆碱能M受体 细胞周期依赖性蛋白激酶5 细胞凋亡 神经毒性
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 179-187
• 页数: 9页
• 分类号: R971
• 字数: 5523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.03.003

摘要

目的 研究胆碱能M受体(主要为M1受体)参与SH-SY5Y细胞周期依赖性蛋白激酶5(Cdk5)调控及其在敌敌畏(DDVP)诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用.方法 ①应用免疫荧光结合共聚焦显微镜检测胆碱能M1受体及Cdk5在SH-SY5Y细胞中的分布和表达.②细胞对照组、氧化震颤素(Oxo-M)组(1×10-4 mol·L-1作用48 h)、罗考唯亭(Rosc)组(培养结束前1 h加入Rosc 1×10-4 mol·L-1)、Rosc+Oxo-M组(Rosc 1×10-4 mol·L-1预处理1 h后,再加入Oxo-M 1×10-4 mol·L-1作用至48 h),应用MTT比色法检测细胞存活率,Western印迹法检测Cdk5表达.③细胞对照组、DDVP组(1×10-5 mol·L-1作用48 h)、Rosc组(培养结束前1 h加入1×10-4 mol·L-1)、Rosc+DDVP组(Rosc 1×10-4 mol·L-1预处理1 h后,再加入DDVP 1×10-5 mol·L-1作用至48 h),用MTT比色法检测细胞存活率,Western印迹法检测Cdk5表达,流式细胞术膜联蛋白Ⅴ-碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 ①激光共聚焦显微镜结果表明,SH-SY5Y细胞中M1受体与Cdk5均有分布和表达.②Oxo-M 1×10-4 mol·L-1处理SH-SYSY细胞48 h,细胞存活率为(59.1±7.3)％,与细胞对照组相比显著降低(P<0.05),Cdk5表达显著升高(P<0.05);Rosc 1×10-4 mol·L-1处理SH-SYSY细胞1 h,Cdk5表达显著降低(P<0.05);Rosc+Oxo-M组细胞存活率为(84.5±20.9)％,与Oxo-M组相比明显升高(P<0.05),Cdk5表达明显降低(P<0.05).③DDVP 1×10-5 mol·L-1处理SH-SYSY细胞48 h,细胞存活率为(68.6±4.1)％,与细胞对照组相比显著降低(P<0.05),Cdk5表达显著升高(P<0.05);Rosc+DDVP细胞存活率为(84.4±8.8)％,与DDVP组相比显著升高,Cdk5表达显著降低(P<0.05).流式细胞术结合TUNEL染色结果显示,DDVP处理SH-SYSY细胞48 h,细胞凋亡率为(64.1±8.4)％,与细胞对照组相比明显升高(P<0.05),TUNEL阳性细胞增多;而Rosc+DDVP组细胞凋亡率为(34.4±9.5)％,与DDVP组相比明显降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞减少.结论 Oxo-M和DDVP可通过增强Cdk5活性引起SH-SY5Y细胞损伤,提示抑制Cdk5活性可显著降低由Oxo-M和DDVP引发的细胞毒作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永安	军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室	2	2	1.0	1.0
2	杨培	军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
3	周琥	军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
4	王丽韫	军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0