一步法qRT-PCR检测蓝舌病病毒25、26和27血清型的建立

• 作者: 宋子昂 廖德芳 李卓然 李占鸿 杨恒 杨振兴
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 蓝舌病病毒(BTV) BTV-25、-26和-27型 基因组节段2(Seg-2) 血清型特异性一步法qRT-PCR
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 185-193
• 页数: 9页
• 分类号: S854.4
• 字数: 6795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.06.019

摘要

蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)是一种严重危害反刍动物的虫媒病毒,自2008年以来世界范围相继发现了BTV-25、-26和-27型3种新血清型BTV,我国也面临新血清型BTV侵入的威胁.本研究根据BTV-25、-26和-27型毒株的基因组节段2(genomic segment 2,Seg-2)序列,合成长度约500 bp的待检靶基因DNA序列,体外转录为单链RNA(single strand RNA,ssRNA)作为参考核酸,设计血清型特异性扩增引物与TaqMan探针,建立BTV-25、-26和-27血清型特异性一步法qRT-PCR.结果表明:成功获取了BTV-25、-26和-27型参考核酸,建立的BTV-25、-26和-27型一步法qRT-PCR检测方法灵敏度高,对BTV-25、-26和-27型ssRNA检测灵敏度分别为4.43×101、5.61×101和4.88×101拷贝/μL;重复性好,组内和组间变异系数在0.48％至1.79％之间;特异性强,与BTV其他血清型毒株、流行性出血病病毒、阿卡斑病毒和非洲马瘟灭活疫苗毒株之间无交叉反应.采集自南方地区的120份BTV核酸阳性血液样本中,未检测到BTV-25、-26和-27型病毒核酸.本研究为我国开展BTV-25、-26和-27型的监测提供了有效的技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨振兴	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	7	27	2.0	5.0
2	廖德芳	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	33	131	7.0	10.0
3	李占鸿	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	8	0	0.0	0.0
4	李卓然	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	3	0	0.0	0.0
5	杨恒	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	9	14	2.0	3.0
6	宋子昂	云南农业大学动物医学院	1	0	0.0	0.0