液相色谱-串联质谱法检测肝癌细胞N6-甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

• 作者: 吕磊 周艳卿 张国庆 李盛建 李群英 王慧 赵亮 须秋萍
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 液相色谱-串联质谱 N6-甲基腺嘌呤核苷甲基化 肝癌细胞
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7|R730.43
• 字数: 4190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2020.01.006

摘要

目的 建立同时测定N6-甲基腺嘌呤核苷(m6A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m6A甲基化水平.方法 HepG2和L02细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理.色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C18柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82∶18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃.质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m6A和A的浓度,计算细胞m6A甲基化水平.结果 建立的LC-MS/MS法检测m6A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r＞ 0.999),日内、日间精密度均小于15.00％,准确度为93.67％～ 101.10％,回收率为91.46％ ～97.60％,基质效应为90.26％～ 99.27％,样品稳定性良好.HepG2和L02细胞m6A甲基化水平分别为(0.73±0.11)％和(1.26±0.22)％.结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m6A甲基化水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张国庆	上海东方肝胆外科医院药剂科	16	98	6.0	9.0
2	吕磊	上海东方肝胆外科医院药剂科	8	15	2.0	3.0
3	王慧	上海东方肝胆外科医院药剂科	6	20	2.0	4.0
4	李盛建	上海宝山区罗店医院药剂科	1	0	0.0	0.0
5	李群英	上海宝山区罗店医院药剂科	1	0	0.0	0.0
6	须秋萍	上海宝山区罗店医院药剂科	1	0	0.0	0.0
7	周艳卿	上海宝山区罗店医院药剂科	1	0	0.0	0.0
8	赵亮	上海宝山区罗店医院药剂科	2	0	0.0	0.0