CD3E蛋白真核表达及全人源CD3单克隆抗体的制备

• 作者: 余琳 吴梦 杨希 葛良鹏 郎巧利 黄楠
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人CD3E 293F悬浮细胞 真核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 971-976
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 5174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.08.016

摘要

目的:高效真核表达和纯化获得CD3E蛋白,制备全人源CD3抗体.方法:构建CD3E链胞外区真核表达质粒,利用293F悬浮细胞表达系统表达并纯化获得高纯度蛋白.选取人源化抗体转基因小鼠CAMouse-HG76进行免疫,通过细胞融合的方法获得杂交瘤细胞,再利用ELISA法和流式细胞分析法筛选CD3特异性单克隆抗体.结果:成功构建重组表达载体pcDNA3.4-CD3E-mFc,真核细胞表达并纯化获得纯度为85％的融合蛋白.免疫小鼠后效价高达1:102400.杂交瘤细胞筛选获得3株CD3特异性单克隆抗体.结论:本研究成功获得了CD3E融合蛋白和CD3单克隆抗体,为后续建立ELISA检测方法、全人源治疗性抗体药物及相关研究提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨希	重庆市畜牧科学院重庆市医用动物资源的开发与利用工程技术研究中心	3	0	0.0	0.0
2	郎巧利	重庆市畜牧科学院重庆市医用动物资源的开发与利用工程技术研究中心	3	0	0.0	0.0
3	黄楠	重庆市畜牧科学院重庆市医用动物资源的开发与利用工程技术研究中心	3	0	0.0	0.0
4	余琳	重庆市畜牧科学院重庆市医用动物资源的开发与利用工程技术研究中心	3	2	1.0	1.0
5	吴梦	重庆市畜牧科学院重庆市医用动物资源的开发与利用工程技术研究中心	7	6	1.0	2.0