三氧化二砷通过毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶通路上调KG1a细胞UL16结合蛋白1的表达

• 作者: 司晓慧 姬曼曼 崔姗姗 李雅慧 牛新清 董家行
• 来源期刊: 中华实用儿科临床杂志
• 关键词: 三氧化二砷 KG1a细胞 自然杀伤细胞 UL16结合蛋白1 毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶通路
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 231-235
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn101070-20190301-00146

摘要

目的 观察三氧化二砷(ATO)对急性髓系白血病细胞KG1a细胞表面NKG2D配体UL16结合蛋白1(ULBP1)表达的影响,探讨其调节ULBP1表达的分子机制.方法 常规体外培养KG1a细胞,采用细胞增殖/毒性检测试剂(CCK8)检测不同浓度ATO对KG1a细胞的增殖抑制率;应用实时荧光定量反转录(RT)-PCR方法检测KG1a细胞ULBP1 mRNA表达的影响;流式细胞术检测ATO对KG1a细胞表面ULBP1蛋白表达的影响.加入毛细血管扩张性共济失调突变和RAD3相关激酶(ATM/ATR)抑制剂咖啡因,观察其是否影响ATO对KG1a细胞ULBP1 mRNA及蛋白的表达.采用Western blot法观察ATO对KG1a细胞中CHK1、CHK2蛋白及其磷酸化表达的影响.结果 不同浓度(1、2、3、4、5 μmol/L) ATO均可抑制KG1a细胞的增殖,呈浓度依赖性,其对KG1a细胞的半数抑制浓度(IC50值)为2.7 μmol/L.荧光定量RT-PCR法检测结果示ATO可使KG1a细胞ULBP1 mRNA的相对表达水平升高,ATO在浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L时,与未加药组比较,ULBP1mRNA相对表达水平分别升高至(1.86±0.30)倍、(3.02 ±0.71)倍、(3.16 ±0.75)倍、(4.80±0.70)倍、(3.70±0.89)倍,差异均有统计学意义(均P＜0.05);与未加药组相比,当ATO浓度分别为1、2、3、4、5μmol/L时,ULBP1蛋白相对表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05).咖啡因预先处理KG1a细胞2h再联合ATO共同孵育KG1a细胞24 h,ULBP1 mRNA和蛋白表达水平均显著降低.在咖啡因浓度为8 mmol/L时,ULBP1 mRNA相对表达水平由不用咖啡因处理组的(9.55±0.38)倍降为(6.36±0.93)倍,差异有统计学意义(P＜0.05);流式细胞术检测结果发现,当咖啡因浓度分别为2、4、8 mmo]/L时,ULBP1蛋白相对表达水平由不用咖啡因处理组的(3.50±0.08)倍分别降为(2.17±0.07)倍、(2.02±0.06)倍、(1.75±0.06)倍,差异均有统计学意义(均P＜0.05).CHK1和CHK2蛋白相对表达水平均随ATO浓度的升高而降低,而CHK1和CHK2磷酸化蛋白的相对表达水平均随ATO浓度的升高而升高.结论 ATO诱导上调KG1a细胞ULBP1mRNA及蛋白的表达,ATM/ATR-CHK1/CHK2通路可能参与这一过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董家行	新乡医学院第三临床学院	2	0	0.0	0.0
2	姬曼曼	新乡医学院第三临床学院	1	0	0.0	0.0
3	崔姗姗	河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡医学院检验学院	1	0	0.0	0.0
4	司晓慧	河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡医学院检验学院	1	0	0.0	0.0
5	李雅慧	河南省免疫与靶向药物重点实验室新乡医学院检验学院	1	0	0.0	0.0