金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性研究

• 作者: 吴庭才 廖成水 张春杰 张晓洁 张梦珂 李琦 李银聚 毛福超 王晓利 程相朝
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 胞外蛋白 核酸酶 金属离子 活性
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 175-181
• 页数: 7页
• 分类号: S855.1
• 字数: 5695字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201905030

摘要

为研究金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,本研究复苏培养金黄色葡萄球菌后取培养上清液,采用透析得到金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白,结果显示获得的该蛋白浓度为48.5 μg/mL.采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响.结果 显示,金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白表现出降解λDNA的核酸酶活性,且最适温度和pH值分别为50℃和9.0,在低温和酸性条件下核酸酶的活性较弱,但胞外核酸酶对70℃以上的耐受性较差.不同浓度的Ba2+、Mg2++和Zn2+对胞外分泌蛋白的核酸酶活性无影响;低浓度(0.01 mmol/L～1 mmol/L)的Ca2+、Ni2+、Cu2+和Mn4+可以促进胞外核酸酶切割λDNA的活性;高浓度的Na+、K+和Fe3+可以提高胞外核酸酶切割λDNA的活性;添加Co2+(0.01 mmol/L～10 mmol/L)可以促进胞外分泌蛋白的核酸酶活性.本研究证实了金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,为进一步研究胞外分泌蛋白在金黄色葡萄球菌和宿主互作中的确切作用奠定了基础.