藤茶黄烷酮3-羟化酶基因AgF3H的克隆及表达分析

• 作者: 伊恒杰 唐进兰 杨志坚 林世强 许明 郑金贵 郭佳鑫
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 藤茶 类黄酮3'-羟化酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 185-192
• 页数: 8页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 5623字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2020.02.0185

摘要

该研究以藤茶叶片为材料,利用RACE技术克隆得到1个黄烷酮-3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)基因,命名为AgF3 H(登录号为JX087441).AgF3H基因的cDNA全长为1 323 bp,其中开放阅读框长1 092 bp,编码363个氨基酸,含有双加氧酶家族的2个特征性结构域和5个保守基序.序列比对与系统进化树分析显示,AgF3H与其他物种F3H的氨基酸序列具有较高的相似性,且与葡萄、山葡萄和圆叶葡萄的亲缘关系最近.qRT-PCR结果显示,AgF3H基因在藤茶不同组织部位都有表达,在芽中的表达量最高,嫩茎中最低,在叶片中的表达量随着成熟度的增加而逐渐降低;不同组织中的AgF3H基因表达量与藤茶类黄酮主要成分二氢杨梅素的含量呈显著正相关.构建AgF3H基因过表达载体并导入烟草中,获得5株转基因植株,其中4株烟草的叶片总黄酮含量比野生型对照有不同程度提高,最高株系提高了26.8％.研究表明,AgF3H基因可能在藤茶类黄酮的生物合成中起重要作用,研究结果为进一步研究藤茶高黄酮含量形成的分子机制奠定了基础.