薄壳山核桃CiDGAT1基因的克隆及表达模式分析

• 作者: 周晓峰 尚杨娟 彭方仁 田朝霞 苏文川 莫正海 谭鹏鹏 邓秋菊 韩明慧 骆敏
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 薄壳山核桃 油脂合成 CiDGAT1 基因克隆 表达模式
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 55-62
• 页数: 8页
• 分类号: S664.1|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.201905023

摘要

[目的]研究薄壳山核桃(Carya illinoinensis)CiDGAT1基因的结构特征和表达模式,为深入分析CiDGAT1基因功能提供理论参考.[方法]以薄壳山核桃'波尼'果实为材料,利用DGAT1基因保守片段设计特异引物,通过3′RACE和RT-PCR技术,克隆薄壳山核桃的CiDGAT1基因.运用生物信息学方法分析其蛋白性质、亲缘进化关系及基因结构.通过实时荧光定量PCR分析该基因在不同品种以及果实不同发育时期的表达模式.[结果]克隆到1条薄壳山核桃油脂合成相关基因CiDGAT1,该基因开放阅读框(ORF)1617 bp,编码538个氨基酸,5′UTR区包含294个碱基,3′UTR区包含340个碱基.基因结构分析显示,CiDGAT1由15个外显子和14个内含子组成.系统进化分析表明CiDGAT1蛋白聚在双子叶植物分支中,与栎树(Quercus suber)QsDGAT1和榛子(Corylus americana)CaDGAT1的亲缘关系最近.实时荧光定量PCR结果表明,在早熟品种'波尼'和晚熟品种'马罕'与'金华'3个品种果实发育过程中,CiDGAT1在'波尼'发育时表达量较高,在145 d成熟期时达到最高,而'马罕'、'金华'品种在生长过程中,CiDGAT1表达量一直缓慢增长,152 d后迅速升高,至最后成熟时达到最高值.[结论]CiDGAT1属于MBOAT家族,在薄壳山核桃果实发育过程中表达量呈上升趋势,是油脂合成过程中重要的调控因子.