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微小RNA-18a-3p靶向调控HEPN1及对骨肉瘤细胞迁移侵袭的影响
微小RNA-18a-3p靶向调控HEPN1及对骨肉瘤细胞迁移侵袭的影响
作者:
李佳
李娜
李涛
王磊
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
骨肉瘤
微小RNA-18a-3p
迁移
侵袭
肝细胞癌下调蛋白1
摘要:
目的 探讨微小RNA-18a-3p(miR-18a-3p)对肝细胞癌下调蛋白1(HEPN1)的靶向调控作用及对骨肉瘤(OS)细胞侵袭迁移的影响.方法 从美国国家生物技术信息中心(NCBI)的GEO数据库中下载基因表达谱OS样本数据集GSE65071的series matrix数据,分析OS患者和健康对照的血浆miR-18a-3p水平;采用实时定量PCR检测OS细胞MG63和成骨细胞hFOB 1.19的miR-18a-3p和HEPN1 mRNA水平,Western blotting检测HEPN1蛋白水平;脂质体介导miR-18a-3p抑制物转染MG63细胞(Inhibitor组),同时设NC组(转染阴性对照序列)和对照组(仅予脂质体处理而未行转染),活细胞计数(CCK-8)法、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数以评估增殖和迁移侵袭能力,构建pmir-GLO载体并借助双荧光素酶报告检测系统验证miR-18a-3p与HEPN1间的靶向关系.结果 GSE65071数据集显示,20例OS患者的血浆miR-18a-3p水平为7.262±0.494,高于15例健康对照的6.005±0.081(P<0.05).与hFOB 1.19细胞相比,MG63细胞的miR-18a-3p水平升高至3.361±0.257,而HEPN1 mRNA水平降低至0.571±0.068,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和NC组相比,Inhibitor组的miR-18a-3p水平降低,而HEPN1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验结果 显示,miR-18a-3p模拟物可抑制转染野生型HEPN13'端非翻译区质粒的细胞相对荧光素酶活性(P<0.05),但对转染突变型质粒的细胞无影响(P>0.05).与对照组和NC组相比,Inhibitor组转染后24 h的增殖活力有降低趋势(P>0.05),而转染48~96 h的增殖活力降低(P<0.05);Inhibitor组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(22.339±4.172)%和(153.673±7.570)个,均低于对照组的(63.007±3.841)%和(365.336±10.772)个及NC组的(65.670±3.101)%和(366.335±13.596)个(P<0.05).对照组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05).结论 miR-18a-3p在OS中高表达且发挥促癌的作用,下调其表达可抑制OS细胞的增殖和迁移侵袭能力,可能与靶向HEPN1有关,miR-18a-3p/HEPN1轴有可能成为OS治疗的潜在靶点.
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篇名
微小RNA-18a-3p靶向调控HEPN1及对骨肉瘤细胞迁移侵袭的影响
来源期刊
临床肿瘤学杂志
学科
医学
关键词
骨肉瘤
微小RNA-18a-3p
迁移
侵袭
肝细胞癌下调蛋白1
年,卷(期)
2020,(5)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
412-417
页数
6页
分类号
R738.6
字数
4741字
语种
中文
DOI
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李娜
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西宁青海省人民医院骨三科
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西宁青海省人民医院骨三科
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西宁青海省人民医院骨三科
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骨肉瘤
微小RNA-18a-3p
迁移
侵袭
肝细胞癌下调蛋白1
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
临床肿瘤学杂志
主办单位:
解放军第八一医院
出版周期:
月刊
ISSN:
1009-0460
CN:
32-1577/R
开本:
大16开
出版地:
南京市杨公井34标34号
邮发代号:
28-267
创刊时间:
1995
语种:
chi
出版文献量(篇)
5564
总下载数(次)
17
总被引数(次)
37767
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