核黄素工业菌株高通量筛选方法的建立和应用

• 作者: 付首颖 刘川 夏苗苗 张大伟 张祎凝 涂然
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 核黄素 枯草芽孢杆菌 96孔板筛选 静置培养 荧光检测
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 合成生物学专题
• 页码范围: 47-53
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-1162

摘要

枯草芽孢杆菌是主要的核黄素工业生产菌之一,高通量筛选技术是选育获得高产核黄素菌株的关键环节.为实现工业菌种选育与高通量筛选技术相结合,对流式细胞分选、液滴微流控分选和96孔板筛选在核黄素工业菌株筛选中的应用进行了研究,并对96孔板筛选方法进行了优化.在流式细胞分析中,来源于同一株工业菌的低产菌株P1与高产菌株R1的细胞荧光与核黄素产量不成正相关.在液滴微流控分析中,P1和R1的发酵液上清荧光与核黄素产量成正相关,然而液滴分选后活细胞的数量很少.在96孔板筛选实验中,振荡培养后P1和R1的发酵液荧光分别为22264 a.u.、28647 a.u.;静置培养后荧光分别为7095 a.u.、10189 a.u.,核黄素产量与荧光成正相关,且二者荧光差异显著.利用96孔板静置培养的方法对工业菌株S1的突变体库进行筛选,得到的优选菌株核黄素产量为2.53 g/L,相比S1提高了15％.这些结果表明96孔板静置培养-荧光检测筛选可以应用于核黄素工业生产菌产量的提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张大伟	中国科学院天津工业生物技术研究所	38	189	7.0	12.0
5	涂然	中国科学院天津工业生物技术研究所	16	101	6.0	10.0
6	夏苗苗	中国科学院天津工业生物技术研究所	3	6	2.0	2.0
7	刘川	中国科学院天津工业生物技术研究所	5	1	1.0	1.0
11	付首颖		1	0	0.0	0.0
15	张祎凝	中国科学院天津工业生物技术研究所	1	0	0.0	0.0