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摘要:
目的:探讨M2型丙酮酸激酶同工酶(PKM2)对新生缺氧缺血性脑病(HIE)小鼠皮质神经元凋亡的影响.方法:根据改良Rice-Vannucci法建立新生小鼠HIE模型,另设假手术组.建模24 h后麻醉小鼠并分离大脑组织,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积,Western blotting、免疫组化和免疫荧光检测皮质组织PKM2、裂解的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和蛋白激酶B(AKT)的表达,TUNEL染色检测神经元细胞凋亡.通过糖氧剥夺(OGD)实验和PKM2-siRNA转染来评价PKM2在体外对神经元凋亡的影响.3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)方法测定存活细胞数.结果:HIE组小鼠的脑梗死体积比显著高于假手术组(43.26%vs 0.71%).与假手术组相比,HIE组小鼠大脑皮质组织和神经元中PKM2蛋白的表达水平显著升高.HIE组小鼠大脑皮质神经元的TUNEL阳性率显著高于假手术组(37.68%vs 8.95%);HIE组小鼠大脑皮质中凋亡相关蛋白cleaved caspase-3的表达水平显著增加,而p-AKT/AKT之值明显降低.体外研究中,OGD处理可显著减少活皮质神经元数量,但下调PKM2的表达可上调活神经元数量.OGD处理显著上调PKM2和cleaved caspase-3蛋白表达,但抑制AKT的磷酸化.敲除PKM2的表达则可显著抑制cleaved caspase-3蛋白的上调,并促进AKT的磷酸化.结论:PKM2在HIE发病过程中表达上调.PKM2表达的上调可能导致AKT信号通路被抑制,进而诱导皮质神经元的凋亡.
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文献信息
篇名 PKM2对新生HIE小鼠神经元凋亡的影响
来源期刊 东南大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 M2型丙酮酸激酶同工酶 缺氧缺血性脑病 皮质神经元 细胞凋亡 蛋白激酶B信号 小鼠
年,卷(期) 2020,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 274-280
页数 7页 分类号 R722.19|R-33
字数 4615字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-6264.2020.03.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 罗玲英 宝鸡市妇幼保健院新生儿科 6 12 2.0 3.0
2 许静 西安交通大学第一附属医院特诊室 40 168 6.0 12.0
3 唐瑾 宝鸡市人民医院新生儿科 5 20 2.0 4.0
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M2型丙酮酸激酶同工酶
缺氧缺血性脑病
皮质神经元
细胞凋亡
蛋白激酶B信号
小鼠
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东南大学学报(医学版)
双月刊
1671-6264
32-1647/R
大16开
南京市丁家桥87号
28-265
1960
chi
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