摘要:
目的 观察大鼠慢性缺血后疼痛(CPIP)模型术后皮肤中N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的细胞来源,探讨NMDA受体在Ⅰ型复杂区域疼痛综合征中的作用.方法 成年雄性SD大鼠42只,采用随机数字表法随机分为假手术(Sham)组(n=12)、CPIP组(n=12)、CHP+生理盐水(NS)组(n=6)、CHP+ NMDA组(n=6)和CHP+NMDA受体拮抗剂(MK801)组(n=6)5组.Sham组随机取6只和CPIP组于造模后1d深麻醉下处死,取术侧足底皮肤和L3~L5脊髓组织用于NMDA受体NR1亚基免疫荧光检测和NR1、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白免疫印迹检测.其余大鼠在造模后2、6、10、14 d记录大鼠机械刺激缩足阈值(MTW)并从造模后第6天开始皮下注射相应药物,于第14天取材皮肤和L3~L5脊髓,检测方法同前.结果 与Sham组相比,CPIP组在造模后第1天的皮肤中NR1表达量(1.708 ±0.064) (t=12.12,P<0.001)、IL-1β表达量(2.575±0.305)(t=5.158,P=0.003)、TNF-α表达量(2.691 ±0.217) (t=7.786,P<0.001)明显升高.给予NMDA和MK801干预后,在造模后第10天,与CPIP+NS组MWT值[(20.37 ±0.95)g]相比,CPIP+ NMDA组大鼠MWT值[(15.85±1.09)g]明显降低(q=10.920,P<0.001),CPIP± MK801组大鼠MWT值[(22.95 ±0.96)g]明显升高(q=6.421,P<0.001).在造模后第14天,与CPIP+ NS组MWT值[(21.57±0.96)g]相比,CPIP+ NMDA组大鼠MWT值[(16.53±1.63)g]明显降低(q=12.190,P<0.001),CPIP+ MK801组大鼠MWT值[(23.27 ±1.28)g]明显升高(q=4.094,P=0.025);与Sham组相比,CPIP组皮肤中NR1表达量(1.708±0.064)明显升高(t=10.910,P<0.001),CPIP+ NS组脊髓中IL-1β表达量(2.518±0.147) (q=11.010,P<0.001)和TNF-α表达量(1.949±0.184)(q=10.870,P<0.001)表达也明显升高;与CPIP+NS组相比,CPIP+ NMDA组大鼠脊髓中IL-1β表达量(4.816±0.607)(q=16.670,P=0.003)和TNF-α表达量(2.629±0.349)(q=7.790,P<0.001)表达明显升高,CPIP+ MK801组大鼠脊髓中IL-1β表达量(1.048±0.257)(q=10.660,P =0.003)和TNF-α表达量(0.790 ±0.165)(q=13.280,P<0.001)表达明显降低.结论 大鼠后足慢性缺血后,皮肤角质细胞中NMDA受体激活,介导IL-1β、TNF-α等炎症因子表达增多,可能参与Ⅰ型复杂区域疼痛综合征的中枢敏化和疼痛传导.