兔斯氏艾美耳球虫感染模型及巢式PCR诊断方法的建立

• 作者: 温福利
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 斯氏艾美耳球虫 病理组织学 巢式PCR 兔
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 477-482
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.06.003

摘要

目的 建立兔斯氏艾美耳球虫(Eimeria stiedai,E.stiedai)感染模型和巢式PCR诊断方法.方法 利用剖检、显微镜观察、血液生化和病理组织学检查等方法对建立的兔E.stiedai模型进行鉴定.通过收集卵囊,提取E.stiedai的DNA,设计特异性引物,建立E.stiedai巢式PCR检测方法.结果 临床剖检:兔腹围明显增大,解剖见肝脏肿大,肝脏表面和实质布满白色及淡黄色结节,胆囊和胆管肿大,胆汁呈淡黄色.显微镜观察:虫卵大小为(31.72～38.43)μm x(18.10～22.69)μm.血液生化检查:球蛋白(GLOB)指标偏高,肌酐(CREA)和碱性磷酸酶(ALKP)指标偏低,其余检测指标均在参考值范围内.病理组织学检查:肝组织和胆管中见大量粉红色E.stiedai虫卵.巢式PCR检查:最低检测限为1个卵囊DNA样本和1.14 × 103拷贝数质粒,阴性对照和空白对照均未出现条带,重复性实验变异性系数＜ 5％.结论 成功构建兔E.stiedai感染模型,建立的巢式PCR诊断方法可扩增出E.stiedai的特异片段,敏感性强,重复性好.