甘氨鹅脱氧胆酸钠通过MAPK/ERK1/2介导Bcl-2在Ser70位点的磷酸化引起人肝细胞癌的抗药

• 作者: 周茂军 李霞 杨满意 肖湘成 陈磊
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞癌 甘氨鹅脱氧胆酸钠 B细胞淋巴瘤-2 磷酸化
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.11.1304

摘要

B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)是一种重要的抗凋亡蛋白质,在多种人类肿瘤中普遍过表达.甘氨鹅脱氧胆酸钠(GCDA)与消化道肿瘤的发生发展密切相关,并能介导肝癌细胞对化疗药物的抵抗.本文旨在探讨在GCDA介导的人肝细胞癌(HCC)耐药性中Bcl-2的作用及其机制.本研究以肝癌细胞系为研究对象,Western印迹结果显示,Bcl-2在多种肝癌细胞系中均有表达.设计靶向Bcl-2的siRNA沉默HCC细胞系内源性Bcl-2的表达,发现Bcl-2沉默之后促进了化疗药物5-FU介导的HCC细胞凋亡.机制上,GCDA可介导Bcl-2在Ser70位点的磷酸化,而Ser70位点的磷酸化能够被PD98059(MAPK/ERK1/2抑制剂)所抑制.构建huBcl2-WT和huBcl2-S70A真核表达载体,脂质体转染HCC细胞系.用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测凋亡细胞.结果 显示,huBcl2-WT过表达能抑制5-FU介导的凋亡,S70位点失活突变成A后,Bcl-2的过表达不能抑制5-FU介导的凋亡.本研究提示,GCDA通过MAPK/ERK1/2通路介导的Bcl-2 Ser70位点的磷酸化,在肝癌细胞的存活和抗药中发挥重要作用.抑制Bcl-2能够促进化疗药物5-FU介导的HCC细胞凋亡,该结果为治疗GCDA介导的耐药性肝癌提供新的思路.