miR-200c通过下调TUBB3基因表达逆转老年肺癌患者顺铂耐药性的机制

• 作者: 刘阳 李少军 赵云龙 陈平
• 来源期刊: 中华老年多器官疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-200c TUBB3基因表达 调控机制
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 433-438
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 字数: 4233字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11915/j.issn.1671-5403.2020.06.102

摘要

目的 探讨miR-200c逆转肺癌细胞顺铂耐药性的作用机制.方法 miR-200c模拟物转染肺癌A549细胞后,采用实时定量PCR法检测miR-200c的表达;采用细胞活力测定(MTS)法检测miR-200c对肺癌A549细胞顺铂耐受性的影响.采用流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞凋亡率的变化.采用Western blotting检测肿瘤细胞耐药蛋白survivin和Bcl-2蛋白的表达.通过生物信息学分析发现miR-200c下游靶分子TUBB3表达存在差异后,构建TUBB33'UTR的野生型和突变型荧光素酶报告载体,然后利用双荧光素酶活性分析miR-200c对TUBB3基因表达的结合位点和调控作用.通过Western blotting检测miR-200c对TUBB3蛋白表达的调控作用以及Bcl-2蛋白和肿瘤细胞耐药蛋白survivin的表达.采用SPSS 19.0统计软件分析实验数据.结果 与对照组相比,miR-200c转染肺癌细胞株后,肺癌细胞对顺铂的敏感性呈明显增加趋势[IC50分别为(37.3±3.1)和(15.3±3.3)μmol/L,P<0.01].过表达miR-200c的A549/DDP组的细胞凋亡率明显高于NC组(P<0.01).而肿瘤耐药相关基因Bcl-2和survivin蛋白表达降低.转染miR-200c mimics的A549/DDP细胞中TUBB3蛋白和mRNA的表达均下调(P<0.01).双荧光素酶活性分析显示miR-200c对TUBB3基因表达具有调控作用(P<0.01).这些结果 均证实TUBB3为miR-200c的下游靶基因.pcDNA-TUBB3质粒转染后,过表达miR-200c的A549/DDP细胞株survivin和Bcl-2蛋白表达较miR-200c mimics组上调.结论 miR-200c可通过下调TUBB3基因的表达逆转肺癌顺铂耐药细胞的耐药性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘阳	解放军总医院第一医学中心胸外科	86	402	10.0	14.0
2	李少军	解放军总医院第四医学中心胸外科	8	23	4.0	4.0
3	赵云龙	解放军总医院第四医学中心胸外科	11	27	3.0	5.0
4	陈平	解放军总医院第四医学中心胸外科	5	23	2.0	4.0