组蛋白去乙酰化酶3对恒定型自然杀伤性T细胞发育和功能的调控作用

• 作者: 刘倚博 刘兆基 张冰 张爱红 张郡 张颖 李会婷 田枫 袁鸿儒 郑全辉 郑爱华 雷冰 马剑楠
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 组蛋白去乙酰化酶3 恒定型自然杀伤性T细胞 细胞发育 细胞功能
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 205-213
• 页数: 9页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4875字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20200201

摘要

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3 (HDAC3)缺失对恒定型自然杀伤性T细胞(iNKT)数量、发育表型和细胞因子产生功能的影响,确定HDAC3在iNKT细胞发育和功能发挥中的调控作用.方法:采用T细胞特异的hdac3基因敲除(HDAC3 KO)及其野生型正常对照(WT)小鼠,每种小鼠各取3～5只,分离小鼠胸腺、脾脏、淋巴结和肝脏淋巴细胞,采用细胞表面抗体染色和流式细胞术检测HDAC3对iNKT细胞数量和发育表型的变化,实验至少重复3次.采用HDAC3KO小鼠及其同系B6.SJL小鼠,每种小鼠各取4～6只;提取以上2种小鼠骨髓细胞,混合后经尾静脉注入经γ射线照射的B6.SJL小鼠,以制备骨髓混合嵌合体模型,8周后流式细胞术检测不同骨髓来源iNKT细胞在胸腺的产生和发育,实验重复3次.选取HDAC3KO和WT小鼠,每种各取小鼠3～5只;采用iNKT细胞特异激活剂半乳糖神经酰胺腹腔注射4h后,收集各组小鼠脾脏淋巴细胞和血清,分别采用细胞内染色、流式细胞术和酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测HDAC3作用下iNKT细胞因子水平,实验至少重复3次.结果:与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠胸腺和外周免疫器官中iNKT细胞比例和数量均明显降低(P＜0.05),且HDAC3KO小鼠胸腺iNKT细胞中CD44-NK1.1-和CD44+ NK1.1一细胞比例明显升高(P＜0.05),而CD44+NK1.1+、CD122+、CD69+和DX5+细胞比例明显降低(P＜0.05).骨髓混合嵌合体实验,与正常B6.SJL小鼠来源的骨髓细胞比较,来源于HDAC3KO小鼠的骨髓细胞产生的iNKT细胞数量明显减少(P＜0.05),同时iNKT细胞中CD44+ NK1.1+细胞比例也明显降低(P＜0.05).细胞因子胞内染色和ELISA法检测,与WT小鼠比较,HDAC3KO小鼠iNKT细胞和血清中IFN-γ和IL-4水平均明显降低(P＜0.05).结论:HDAC3缺失通过内源性机制导致iNKT细胞数量减少,细胞发育成熟受阻;同时HDAC3缺失导致iNKT细胞因子产生功能明显降低.提示HDAC3在iNKT细胞的发育和功能发挥中具有重要调控作用.