miR-214抑制牙囊细胞成骨分化的体外研究

• 作者: 刘奕杉 左婕 朱少军 王智亨 王梦琪
• 来源期刊: 口腔疾病防治
• 学科: 医学
• 关键词: 牙囊细胞 双向差速传代法 miR-214 Wnt/β-catenin 成骨分化 碱性磷酸酶 骨粘连蛋白 成骨相关转录因子2 矿化结节
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 146-152
• 页数: 7页
• 分类号: R78
• 字数: 4044字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12016/j.issn.2096-1456.2020.03.002

摘要

目的 探讨miR-214对于牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)成骨分化的影响.方法 双向差速传代法体外培养提纯牙囊细胞,以未转染的DFCs为对照(DFCs组),通过向DFCs中转染miR-214-3p mimics(miR-214 mimics组)或miR-214-3p inhibitor(miR-214 inhibitor组)分别上调和下调DFCs中的miR-214的表达.成骨诱导7 d,qRT-PCR检测miR-214表达及相关成骨基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨粘连蛋白(os-teonectin,OSN)、成骨相关转录因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX-2)的mRNA表达,免疫蛋白印迹检测各组RUNX-2、β-catenin蛋白表达;成骨诱导14 d茜素红染色观察矿化结节形成的情况.结果 骨诱导7 d,相较DFCs组,miR-214 mimics组miR-214的表达上调,miR-214 mimics组成骨相关基因ALP、OSN及RUNX-2的mRNA表达均低于DFCs组,但仅ALP在两组的差异具有统计学意义(P＞0.05),而miR-214 inhibitor组成骨相关基因ALP、OSN、RUNX-2的mRNA表达均高于DFCs组,且差异均具有统计学意义(P＜0.05).miR-214 mimics组RUNX-2、β-catenin的蛋白表达均低于miR-214 inhibitor组.miR-214 mimics组钙化结节明显少于DF-Cs组,而miR-214 inhibitor组钙化结节却明显多于DFCs组.结论 miR-214上调可使β-catenin表达下调,并抑制成骨相关基因ALP、OSN及RUNX-2的表达,抑制成骨分化;下调miR-214,结果相反;miR-214可能是通过下调β-catenin的表达,抑制DFCs的成骨分化.