山羊痘病毒LAMP检测方法的建立

• 作者: 付明哲 张琪 徐滢 许信刚
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 环介导等温扩增 山羊痘病毒 ORF103基因 检测方法
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4185字
• 语种: 中文

摘要

为了建立适用于基层养殖场快速、可视化的山羊痘病毒(GTPV)环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法,根据GenBank公布的GTPV ORF103保守区核苷酸序列为靶序列,设计并合成一组特异性LAMP引物,优化反应条件(时间、温度)和反应体系(dNTP、内外引物浓度比),并进行特异性和灵敏度试验.结果表明,所建立的LAMP方法在65℃时反应50 min即可获得清晰的梯状条带;扩增物经10×SYBR GreenⅠ荧光染料染色,紫外线照射或日光下即可直接判定结果;灵敏度试验结果表明,该方法能够检出的GTPV核酸最低浓度为1.287 ng/mL,与常规PCR方法相比,灵敏度增高100倍;该方法特异性良好,与小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊支原体(Mccp)、羊口疮病毒(ORFV)均无交叉反应;对10份临床样品检测结果显示,该方法与传统PCR检测结果一致.建立的LAMP检测方法可用于临床山羊痘病毒的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许信刚	西北农林科技大学动物医学院	116	501	10.0	14.0
2	张琪	西北农林科技大学动物医学院	75	218	9.0	11.0
3	付明哲	西北农林科技大学动物医学院	94	346	10.0	14.0
4	徐滢	西北农林科技大学动物医学院	4	1	1.0	1.0