牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 侯力丹 刘丹 张敏 李建 杨飞 郎洪武 黄小洁
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 牛传染性鼻气管炎病毒 gD蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: S852.653
• 字数: 3631字
• 语种: 中文

摘要

为制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gD蛋白单克隆抗体,并对其免疫学特性进行分析与鉴定.用CHO细胞表达的IBRV-gD蛋白作为免疫原免疫8周龄的Balb/c小鼠,无菌取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞株,经小鼠腹腔注射,待小鼠腹腔膨胀后,收集腹水,纯化后进行单克隆抗体浓度、纯度、类及亚类、抗体效价、相对亲和常数、Western blot和间接免疫荧光测定.结果表明,筛选到2株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为4G3D4和9D7A7.4G3D4和9D7A7这2株单抗纯化后的浓度分别为2.6 mg/mL、1.6 mg/mL;亲和常数分别为2.30E+10、1.88E+09;抗体亚类均为IgG1,轻链为kappa链;且均能与IBRV发生特异性反应,与接种IBRV的MDBK细胞发生反应,产生特异性荧光;间接ELISA测定腹水效价分别为1:204800、1:12800.利用CHO细胞表达的IBRV-gD蛋白成功制备了2株单克隆抗体,为下一步建立特异性的IBRV检测方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丹		21	42	3.0	6.0
2	郎洪武		30	205	8.0	13.0
3	黄小洁		16	73	4.0	8.0
4	杨飞		3	0	0.0	0.0
5	侯力丹		11	4	1.0	1.0
6	李建		1	0	0.0	0.0
7	张敏		1	0	0.0	0.0