猪圆环病毒2型衣壳蛋白优势B细胞表位重组蛋白免疫原性研究

• 作者: 尚佑军 尹双辉 张辛铭 杨顺利 肖星星 蔡建平 高雪
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 衣壳蛋白 抗原表位 免疫原性
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 4920字
• 语种: 中文

摘要

猪圆环病毒2型(PCV-2)衣壳蛋白(Cap)是研制基因工程疫苗和血清抗体检测方法的主要候选抗原.为筛选免疫原性强的Cap抗原表位,将定位在Cap上的6个B细胞线性表位的编码基因序列重新组合,命名为R1234、R1235、R1236、R2345、R2346和R3456,然后克隆至pET32a原核表达载体,转化到大肠埃希菌中进行诱导表达.通过对表达和纯化条件的优化,最终获得6个多抗原表位串联体的重组蛋白.West-ern blot和间接ELISA结果显示,6组重组表位蛋白均能被PCV-2阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性.将其与完整Cap分别免疫Balb/c小鼠,检测免疫后血清中特异性抗体和细胞因子水平以及脾脏淋巴细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞的比例.结果表明,R2346组合刺激机体产生的特异性抗体和细胞因子IFN-γ、IL-4的水平明显高于其他组,脾脏淋巴细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞含量与对照组相比显著增加(P<0.05),说明该重组蛋白能够刺激体液免疫和细胞免疫反应.因此,筛选获得的R2346重组表位蛋白可以作为研制PCV-2多表位基因工程疫苗和血清抗体诊断方法的候选抗原,用于PCV-2的预防和控制工作中.