miR-146b在高糖环境下对肾小球系膜细胞的作用研究

• 作者: 孙丰田 尹思琪 王琼妮 纪成 胡玉燕 钱晖
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-146b 糖尿病肾病 大鼠肾小球系膜细胞 YAP
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 534-538
• 页数: 5页
• 分类号: R329.2|R446
• 字数: 4243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2020.07.14

摘要

目的 探讨miR-146b在高糖环境下对肾小球系膜细胞的作用.方法 构建高糖培养环境,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-146b在大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)、足细胞(podocyte)及肾小球系膜细胞(HBZY-1)中的表达水平;western blot分析过表达/敲减miR-146b前后,HBZY-1细胞中YAP及磷酸化YAP(p-YAP)蛋白的表达水平;细胞免疫荧光法检测YAP蛋白的表达情况.结果 体外经高糖刺激后,HBZY-1细胞中miR-146b的表达水平(2.197±0.166)明显升高(t=7.215,P<0.01).western blot结果显示,高糖组YAP蛋白(0.753±0.008)的表达水平升高(t=32.17,P<0.001),p-YAP蛋白(0.372±0.005)的表达水平降低(t=39.56,P<0.001);免疫荧光结果显示,高糖组YAP蛋白荧光强度(53.620±4.229)明显升高(t=5.410,P<0.01).过表达miR-146b后,western blot结果显示,YAP蛋白(0.883±0.005)表达上调(t=10.71,P<0.001),而p-YAP蛋白(0.606±0.006)表达下调(t=44.16,P<0.001);免疫荧光结果显示,YAP荧光强度(25.70±1.589)增强(t=10.45,P<0.001).敲减miR-146b后,western blot结果显示,YAP蛋白(0.706±0.002)表达下调(t=22.15,P<0.001),p-YAP蛋白(0.774±0.003)表达上调(t=25.61,P<0.001);免疫荧光结果显示,YAP荧光强度(8.900±1.022)减弱(t=11.56,P<0.001).结论 miR-146b在高糖刺激的HBZY-1细胞中表达上调,可能通过调控YAP信号参与肾细胞损伤.