姜黄素抑制动力相关蛋白1介导的线粒体分裂抗H9c2细胞低氧复氧损伤

• 作者: 牟幼灵 吕京珂 赵瑞 韩丽萍 刘骞
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 关键词: 姜黄素 低氧 线粒体分裂 线粒体片段化 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 899-906
• 页数: 8页
• 分类号: R299
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2020.12.002

摘要

目的 研究姜黄素(Cur)对H9c2细胞低氧复氧(H/R)损伤的保护作用并探讨其机制及其与动力相关蛋白1(Drp1)介导的线粒体分裂的关系.方法 H9c2细胞用Cur 1,5和10μmol·L-1孵育12 h,然后低氧16 h/复氧2 h.CCK-8法检测细胞存活率,酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,DHE荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量,MitoTracker荧光探针观察线粒体形态,Calcein-AM荧光探针荧光强度评价线粒体通透性转换孔开放,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,荧光素酶检测细胞ATP含量,TUNEL法检测细胞凋亡率,Western印迹法检测Drp1、磷酸化Drp1(p-Drp1)、细胞色素c和活化胱天蛋白酶3蛋白表达.结果 与细胞对照组相比,H/R组细胞存活率明显下降(P<0.01),LDH漏出量增加(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01),MDA和ROS含量增加(P<0.01),线粒体片段化增加(P<0.01),线粒体密度降低(P<0.01),线粒体分裂蛋白Drp1和p-Drp1表达上调(P<0.01),线粒体通透性转换孔开放增加(P<0.01),线粒体膜电位去极化(P<0.01),细胞ATP水平降低(P<0.01),细胞色素c从线粒体释放到细胞浆增加(P<0.01),活化胱天蛋白酶3表达上调(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01).与H/R组相比,Cur 10μmol·L-1可显著减轻细胞损伤(P<0.01),减少LDH漏出量(P<0.01),增加SOD活性(P<0.01),降低ROS和MDA含量(P<0.01),抑制线粒体片段化(P<0.05),增加线粒体密度(P<0.05),下调线粒体分裂蛋白Drp1表达和磷酸化水平(P<0.05),维持线粒体通透性转换孔结构(P<0.01)和线粒体膜电位极化(P<0.01),增加ATP含量(P<0.05),降低细胞色素c释放(P<0.05)和活化胱天蛋白酶3蛋白表达(P<0.05),抑制细胞凋亡(P<0.01).结论 Cur可以通过抑制Drp1介导的线粒体分裂,维持线粒体形态稳定和功能正常,减轻氧化应激和细胞凋亡,从而发挥抗H9c2细胞H/R损伤作用.