miRNA-135b上调APC基因甲基化在2型糖尿病肾病发生、发展中的作用及分子机制

• 作者: 王鸣 费晓 赵宁 陈琦 韩辉 高婵
• 来源期刊: 中华内分泌外科杂志
• 关键词: 糖尿病肾病 活化蛋白C DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 405-410
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn.115807-20200615-00186

摘要

目的:本研究旨在探讨外周血中APC基因DNA甲基化与糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）发生、发展的关系，分析其对基因转录和蛋白表达水平的影响，探讨miRNA135b对APC基因甲基化水平的调控作用。方法:选择2018年3月至2020年3月在浙江大学附属杭州市第一人民医院肾内科的96例DN患者和同期100例健康体检者作为研究对象，分别检测两组APC基因CpG岛甲基化水平、mRNA水平和蛋白表达水平。用三联法构建Sprague-Dawely（SD）大鼠DN模型，分为DN组、miRNA-135b过表达慢病毒组和空载病毒组，将miRNA-135b过表达慢病毒和空载病毒通过尾静脉注射到大鼠体内，1个月后处死大鼠，测定其肾组织中的miRNA-135b的表达水平和APC基因甲基化水平。结果:DN患者的APC-1岛的甲基化水平为（3.05±0.65）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（2.34±0.56）%（ t=5.231， P<0.001）；DN患者的APC-2岛的甲基化水平为（1.65±0.37）%，显著高于健康对照组的甲基化水平（1.17±0.29）%（ t=4.381， P<0.001）；Pearson相关分析结果显示，APC-1岛的甲基化水平与血清肌酐和尿酸比值呈显著正相关关系（ P均<0.05），APC-2岛的甲基化水平与尿酸呈显著正相关（ P<0.05）；DN患者APC-1岛的甲基化水平与mRNA相对表达量间呈显著负相关（ r=-0.426， P=0.019）；此外，DN患者的APC-1岛的甲基化水平与APC蛋白水平间呈显著负相关（ r=-0.569， P=0.004）。miRNA-135b在过表达慢病毒组大鼠中的表达均显著高于空载病毒组（ t=5.432， P<0.001）和DN组大鼠（ t=5.812， P<0.001）；miRNA-135b过表达慢病毒组大鼠的APC甲基化水平也均显著高于DN组（ t=6.217， P<0.001）和空载病毒组大鼠（ t=6.446， P<0.001）。 结论:miRNA-135b可能通过上调APC基因DNA甲基化，降低mRNA和蛋白表达水平，从而参与到DN的发生、发展中。