绿原酸体外抗新型鸭呼肠孤病毒作用的研究

• 作者: 于可响 唐亮 李桂明 林树乾 潘力 马秀丽 黄中利
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新型鸭呼肠孤病毒 绿原酸 抗病毒 qPCR
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 754-760
• 页数: 7页
• 分类号: S83
• 字数: 4501字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.04.017

摘要

由新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)引起的NDRV病是困扰我国养鸭业的主要疾病之一.绿原酸(chlorogenic acid,CHA)作为许多中药的主要成分,在抗病毒方面发挥着重要作用.本研究拟明确CHA在NDRV感染幼仓鼠(Mesocricetus auratus)肾细胞系BHK-21不同阶段的抗病毒作用效果,为CHA抗NDRV的临床治疗提供参考依据.首先根据NDRV的S3基因序列(GenBank No.KJ879932)设计引物,建立NDRV实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,qPCR)检测方法;然后采用细胞增殖-毒性检测试剂盒测定CHA的细胞毒性,确定CHA在BHK-21细胞上的最大安全浓度;最后进行抗病毒试验,组Ⅰ向BHK-21细胞接种病毒NDRV,然后加入不同浓度的CHA,定期收集细胞冻融液;组Ⅱ的病毒吸附方式与组Ⅰ相同,用药前病毒NDRV先在BHK-21细胞上增殖10 h,定量检测增殖10 h后的病毒载量作为基值;以病毒增殖10 h为实验起始点,分别加入不同浓度的CHA,后续流程与组Ⅰ相同;以上两组均设置阴性和阳性对照.定期观察细胞病变,并将收集的样品进行NDRV的qPCR检测.结果显示,本研究建立的用于NDRV检测的qPCR方法最低检测限为92.5拷贝/μL;CHA在BHK-21细胞上的最大安全浓度为128μg/mL;CHA能在体外抑制NDRV增殖,存在明显的剂量效应关系.本研究可为NDRV的相关机制研究和实际应用提供基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄中利	山东省农业科学院家禽研究所	38	80	4.0	7.0
2	于可响	山东省农业科学院家禽研究所	37	184	7.0	12.0
3	李桂明	山东省农业科学院家禽研究所	46	138	6.0	9.0
4	马秀丽	山东省农业科学院家禽研究所	43	483	11.0	20.0
5	潘力	山东省农业科学院家禽研究所	2	0	0.0	0.0
7	唐亮	山东省农业科学院家禽研究所	5	12	2.0	3.0