宫颈癌细胞培养上清液诱导THP-1巨噬细胞M2表型

• 作者: 张淑珍 徐献丽 朱迎萍 温明晓 窦晓青 许江燕
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 THP-1巨噬细胞 M2型巨噬细胞 细胞因子
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 371-376
• 页数: 6页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2020.05.004

摘要

目的:研究宫颈癌细胞培养上清液诱导并维持THP-1巨噬细胞M2表型的作用.方法:培养宫颈癌 细胞系HeLa细胞至第3天,收集细胞培养上清液用以检测肿瘤相关细胞因子(IL-4?IL-6及IL-10)及生长因子(ANG-2?HGF?VEGF)分泌情况.将培养至对数生长期的巨噬细胞分为空白对照组(Mθ组)?M2细胞诱导组(M2组)以及HeLa细胞培养上清液处理组(Mθ+sHeLa组).其中M2组予以20 ng/mL IL-4?20 ng/mL IL-10处理使其向M2 细胞极化,Mθ+sHeLa组加入50% HeLa细胞培养上清液处理培养3 d.随后,利用流式细胞术检测各组细胞表面HLA-DR?CD163?CD206的变化;同时,收集细胞培养上清液并检测其中相关细胞因子?生长因子及TGF-β3的含量.最后,采用流式细胞术及Western blot检测巨噬细胞中JAK-STAT6信号通路的变化.结果:HeLa细胞培养上清液中IL-6?HGF?VEGF含量较多.经过HeLa细胞培养上清液处理后的巨噬细胞表面CD163和CD206含量升高(P <0.05).相较于Mθ组,M2 组及Mθ+sHeLa组的巨噬细胞培养上清液中的相关细胞因子(IL-4?IL-6及IL-10)?生长因子(ANG-2?HGF?VEGF)及TGF-β3 含量升高(P <0.05).去除HeLa细胞培养上清液后48 h后,相较于Mθ组,Mθ+sHeLa组分泌相关细胞因子?生长因子及TGF-β3 含量升高(P <0.05).流式细胞术及Western blot结果显示,与Mθ组比,Mθ+sHeLa组的pSTAT6水平升高(P <0.05).结论:HeLa细胞培养上清液可通过激活JAK-STAT6信号通路诱导的THP-1巨噬细胞向M2表型的极化促进肿瘤的生长和血管生成.