我国主要流行的4种血清型禽腺病毒-Ⅰ群Fiber蛋白的交叉中和研究

• 作者: 刘均华 孙举 尹燕博 张本清 栾庆东 王建琳
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: FAdV Fiber蛋白 原核表达 交叉中和
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 资源环境·植物保护
• 页码范围: 214-219
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.20191066

摘要

为确定FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11这4个血清型FAdV间存在的交叉保护是否与病毒的纤维蛋白(Fiber)有关,制备4个血清型FAdV Fiber蛋白抗血清,在细胞水平研究其对本血清型和其他3种血清型病毒感染的中和作用.针对4个血清型FAdV的Fiber基因设计引物,进行PCR扩增,构建pCold-FAdV-Fiber重组质粒,分别转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物;表达产物纯化后免疫SPF鸡,采集抗血清,通过LMH细胞研究不同血清型Fiber蛋白血清对各血清型FAdV感染的中和作用.PCR扩增结果显示,FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11 Fiber基因产物大小分别为1440,1575,1566,1719 bp;重组菌在16℃培养条件下,1.0 mmol/L的IPTG诱导24 h可溶性重组蛋白的表达量最高;SDS-PAGE和Western Blot结果显示,FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11表达的蛋白分子量大小分别为102,107,107,112 ku;中和结果显示,FAdV-4、FAdV-8b和FAdV-11 Fiber蛋白抗血清能中和自身血清型FAdV对细胞的感染,不能中和其他血清型FAdV的感染,而FAdV-8a Fiber蛋白抗血清不能中和这4种血清型中的任何一种血清型FAdV的感染.综上,Fiber蛋白与4个血清型FAdV全病毒之间存在的交叉保护无直接关系.