miR-433-3p靶向MAPK8对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用

• 作者: 万智双 曹宸 熊丁
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 miR-433-3p 有丝分裂原活化蛋白激酶8 增殖与凋亡 侵袭与迁移
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 57-62
• 页数: 6页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.01.011

摘要

目的:探究miR-433-3p对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK8)的靶向调控作用及其对肝癌细胞MHCC97H增殖、凋亡和迁移的调控作用.方法:RT-PCR检测了SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B肝癌细胞株和HL-7702人正常肝细胞株中miR-433-3p的表达.荧光素酶报告实验检测miR-433-3p和MAPK8的相互作用.将MHCC97H细胞分为空白对照(Control)组、阴性对照(NC)组、miR-433-3p组、pc-MAPK8组和miR-433-3p+pc-MAPK8组,按照分组分别转染miR-433-3pmimic或pc-MAPK8,RT-PCR检测miR-433-3p和MAPK8转录水平,CCK8法检测细胞增殖,Hoechst法检测细胞凋亡,划痕愈合法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blot检测MAPK8、增殖细胞核抗原(PCNA)、活化半胱天冬酶3(cl-CASP3)、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)蛋白表达.结果:与正常肝细胞株HL-7702比较,肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2、MHCC97H、Hep3B中miR-433-3p表达显著降低.在荧光素酶报告实验中,与MAPK8野生型(WT)+NC比较,MAPK8 WT+miR-433-3p组荧光素酶活性显著降低.在细胞实验中,与Control组比较,miR-433-3p组miR-433-3p表达升高,MAPK8转录和蛋白表达降低,MHCC97H细胞的增殖水平降低,凋亡水平升高,迁移和侵袭能力下降,PCNA和N-cadherin蛋白表达下降,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达升高;pc-MAPK8组MAPK8蛋白表达升高,MHCC97H细胞的增殖水平升高,凋亡水平降低,迁移和侵袭能力提高,PCNA和N-cadherin蛋白表达升高,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达降低.与pc-MAPK8组比较,miR-433-3p+pc-MAPK8组MAPK8蛋白表达降低,MHCC97H细胞的增殖水平降低,凋亡水平升高,迁移和侵袭能力下降,PCNA和N-cadherin蛋白表达降低,cl-CASP3和E-cadherin蛋白表达升高.结论:miR-433-3p可靶向作用于MAPK8,抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万智双		5	8	2.0	2.0
2	熊丁		2	4	2.0	2.0
3	曹宸		3	2	1.0	1.0