PLA2R真核表达细胞株的构建及其在膜性肾病诊断中的应用

• 作者: 冯晓燕 刘晓梅 张佳 张智萍 张菲菲 张贺秋 李伟皓 李江雪 沈宝艳 王超男
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膜性肾病 磷脂酶A2受体 细胞株 质粒 免疫荧光方法
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5,13
• 页数: 6页
• 分类号: R692|R392.12
• 字数: 5143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2020.04.001

摘要

目的 构建表达磷脂酶A2受体(phospholipase A2 receptor,PLA2R)的稳定细胞株并对其在膜性肾病(membranous nephropathy,MN)诊断中的应用进行初步评价.方法 人工合成pIRES-PLA2R真核表达质粒并稳定转染CHO细胞,筛选后分别进行RT-PCR,Western免疫印迹和细胞免疫荧光方法(immunofluorescence assay,IFA法)鉴定.以构建的稳定细胞株建立PLA2R自身抗体IFA法并对2018～2019年收集的97例肾病患者血清样本进行初步检测.结果 成功构建表达PLA2R蛋白的稳定细胞株CHO-PLA2R并以该细胞株为基础建立PLA2R自身抗体IFA法.与ELISA试剂盒检测结果相比,阴性样本符合率为100％(55/55);阳性样本符合率为76.2％(32/42);总体符合率为89.7％(87/97).Kappa检验具有一定的一致性(P<0.05).结论 成功构建表达PLA2R蛋白的稳定细胞株,并应用该细胞株建立了检测PLA2R自身抗体的IFA检测方法.