迷迭香酸通过调控自噬抑制高糖诱导的HRMEC血管生成

• 作者: 周凌霄 李亚 李蓉 陈琳 马雅玲
• 来源期刊: 中国中医眼科杂志
• 关键词: 迷迭香酸 自噬 高糖 视网膜内皮细胞 血管生成
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 691-698
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2020.10.002

摘要

目的 探讨迷迭香酸(RA)对高糖培养条件下人视网膜微血管内皮细胞(HRMEC)血管生成的影响及与自噬的关系.方法 将HRMEC随机分为正常对照组(NC组)、高糖组(HG组)、低浓度RA组(LC组)、中浓度RA组(MC组)、高浓度RA组(HC组).NC组细胞,在低糖培养基中培养;HG组细胞,在培养基中加入30 mmol/L D-葡萄糖培养;LC组细胞,在培养基中加入25μmol/L RA+30 mmol/L D-葡萄糖培养;MC组细胞,在培养基中加入50μmol/L RA+30 mmol/L D-葡萄糖培养;HC组细胞,在培养基中加入100μmol/L RA+30 mmol/L D-葡萄糖培养.培养48 h.分别采用MTT、Transwell及Matrigel法检测细胞增殖、迁移和管腔形成;电镜下各组细胞内的自噬泡形成情况;采用Western blot法检测各组细胞的自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及Beclin-1的表达.结果 (1)HRMEC增殖:与NC组比较,HG组细胞增殖率增加(t=-98.465,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组和HC组细胞增殖率依次降低(t LC=8.198,P=0.001;t MC=12.427,P=0.000;t HC=44.898,P=0.000),差异有统计学意义.(2)HRMEC迁移:与NC组比较,HG组细胞迁移数均增加(t=-22.958,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞迁移数依次降低(t LC=17.504,t MC=22.463,t HC=20.330,均P=0.000),差异有统计学意义.(3)HRMEC管腔形成:与NC组比较,HG组细胞管腔形成数增加(t HG=-13.924,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组和HC组细胞管腔形成数依次降低(t LC=3.528,P=0.024;t MC=7.437,P=0.002;t HC=11.213,P=0.000),差异有统计学意义.(4)HRMEC自噬泡:与NC组相比,HG组细胞质内自噬泡增多,LC组、MC组和HC组自噬泡较HG组减少,且RA浓度越高,自噬泡越少.(5)自噬蛋白LC3表达:与NC组比较,HG组LC3-II/LC3-I比值增加(t=-86.500,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组和HC组的LC3-II/LC3-I比值依次降低(t LC=40.000,t MC=35.002,t HC=37.165,均P=0.000),差异均有统计学意义.(6)自噬蛋白Beclin-1表达:与NC组比较,HG组表达增加(t=-85.865,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组表达依次降低(t LC=13.762,t MC=23.200,t HC=50.051,均P=0.000),差异有统计学意义.结论 RA可通过抑制细胞自噬从而抑制高糖诱导的视网膜血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成,且效应随着RA浓度的升高而增强.