西马特罗多克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立

• 作者: 司艳芳 孙国鹏 岳锋 李鹏 王选年 郭东光
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 西马特罗 重氮化法 完全抗原 间接竞争ELISA 多克隆抗体 残留检测
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 157-164
• 页数: 8页
• 分类号: S859.84
• 字数: 5402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.06.021

摘要

为建立一种特异、敏感、快速、准确的西马特罗(Cimaterol,CIM)残留检测方法,成功合成其完全抗原并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立其免疫学检测方法.应用重氮化法偶联西马特罗与载体蛋白BSA、OVA,合成免疫抗原CIM-BSA和检测抗原CIM-OVA,并采用UV、SDS-PAGE、质谱3种方法进行完全抗原的鉴定.用CIM-BSA免疫新西兰大白兔制备抗西马特罗多克隆抗体并建立间接竞争ELISA检测方法.结果表明,成功合成了西马特罗完全抗原,具有合成抗原的分子特征;免疫新西兰大白兔后,成功制备了抗西马特罗多克隆抗体,其效价为1:64000,对西马特罗的半数抑制质量浓度为4.26μg/L,与特布他林、莱克多巴胺、沙丁胺醇、齐帕特罗等 β2型受体激动剂药物无交叉反应.经过条件优化,建立了西马特罗间接竞争性ELISA检测方法,其最低检测限为0.04μg/L,在0.1～12.8μg/L检测范围内,线性关系拟合度为R2=0.9771,拟合曲线方程为y=-0.2469x+0.6623.检测猪尿和饲料样品,回收率分别为96.3％～103.9％和67.0％～105.0％.综上,成功建立了具有良好应用前景的西马特罗间接竞争ELISA免疫学检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王选年	新乡学院生命科学技术学院	26	90	5.0	9.0
2	李鹏	新乡学院生命科学技术学院	22	24	3.0	4.0
3	郭东光	新乡学院生命科学技术学院	5	9	1.0	3.0
4	岳锋	新乡学院生命科学技术学院	12	31	3.0	5.0
5	孙国鹏	新乡学院生命科学技术学院	12	31	4.0	5.0
6	司艳芳	新乡学院生命科学技术学院	1	0	0.0	0.0