miR-21-5 p通过靶向TGF-β1改善LPS诱导的脓毒症实验研究

• 作者: 刘传明 尹文 李俊杰 杨昌伟 赵鹏 雷磊
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脓毒症 miR-21-5p 转化生长因子β1 降钙素 白介素-6 肿瘤坏死因子-α 丙二醛 超氧化物歧化酶 小鼠,C57BL
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: R-332|R631
• 字数: 4945字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2020.07.002

摘要

目的 确定miR-21-5p与转化生长因子-β1(TGF-β1)的靶向关系,并探索miR-21-5p和TGF-β1相互作用对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症小鼠的影响.方法 构建LPS诱导的脓毒症小鼠模型,检测其降钙素和超敏C反应蛋白的水平以确定构建成功.将小鼠分为对照组、脓毒症组、NC antagomir组、miR-21-5p antagomir组、siRNA-NC组、si-TGF-β1组,每组6只.miR-21-5p antagomir组静脉注射miR-21-5p antagomir以低表达miR-21-5p,si-TGF-β1组静脉注射si-TGF-β1以低表达TGF-β1,通过qRT-PCR检测miR-21-5p和TGF-β1的表达情况.用TargetScan软件预测miR-21-5p与TGF-β1的靶位点,将miR-21-5p antagomir和si-TGF-β1分别转染293T细胞,用Western blot检测TGF-β1的表达水平,通过双荧光素酶报告分析测定野生型(TGF-β1-wt)和突变型(TGF-β1-mut)对荧光素酶活性影响,进一步确定miR-21-5p与TGF-β1的靶向关系.测定对照组、脓毒症组、miR-21-5p antagomir组、si-TGF-β1组小鼠血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、降钙素和超敏C反应蛋白的水平.结果 构建LPS诱导的脓毒症小鼠血清降钙素和超敏C反应蛋白、TGF-β1水平高于对照组,miR-21-5p低于对照组(P<0.05,P<0.01).分别转染miR-21-5p antagomir和si-TGF-β1到模型小鼠后,miR-21-5p和TGF-β1表达显著降低,瞬转成功.在TGF-β1的3'UTR区425-432 bp区域有2个hsa-miR-21-5p潜在的靶向结合位点.与对照组比较,将si-TGF-β1转染到293T细胞后TGF-β1的表达量显著下降,而与对照组和转染si-TGF-β1组比较,转染miR-21-5p antagomir后TGF-β1的表达量显著提升(P<0.05,P<0.01).相对于TGF-β1-mut,TGF-β1-wt能使荧光素酶的活性显著下降(P<0.05).与对照组比较,脓毒症组小鼠血清IL-6、TNF-α、MDA、降钙素和超敏C反应蛋白的水平都显著提升,SOD活性显著下降(P<0.05,P<0.01);与脓毒症组比较,miR-21-5p antagomir组上述指标更加恶化,而si-TGF-β1组则显著改善(P<0.05).结论 miR-21-5p通过靶向抑制TGF-β1的表达来减轻LPS诱导的脓毒症引起的炎症、氧化应激反应,进而改善脓毒症.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘传明	中国人民解放军空军军医大学西京医院急诊科	2	22	1.0	2.0
2	李俊杰	中国人民解放军空军军医大学西京医院急诊科	12	27	4.0	4.0
3	赵鹏	中国人民解放军空军军医大学西京医院急诊科	33	69	5.0	7.0
4	雷磊	中国人民解放军空军军医大学西京医院急诊科	13	30	4.0	4.0
5	尹文	中国人民解放军空军军医大学西京医院急诊科	12	79	4.0	8.0
6	杨昌伟	中国人民解放军空军军医大学西京医院急诊科	1	0	0.0	0.0